主题:【讨论】梯度变化问题吗?

浏览0 回复17 电梯直达
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pandora98
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
只要液相泵的控制范围内,各组分或待测组分能达到要求的系统适应性要求,梯度设置完全可以从高到低,没有人规定一定是从低到高。

理论上是这样,但是实际操作起来,大比例的有机相降到小比例有一定的延迟,且对很多极性非常相近的样品,尤其是极性大的样品很难分离开来。
所以对于极性小的样品可以适当提高有机相的起始比例,但是变化趋势最好还是要由小到大。
当然,也有亲水色谱,梯度变化的趋势是有机相比例由大到小。
该帖子作者被版主 xky02306992积分, 2经验,加分理由:分析的很有道理
有水有渝
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原文由 muziying114(muziying114) 发表:
没有什么规矩吧,在不损伤仪器和色谱柱条件下,怎么做都行,只要自己感觉良好就可以了!

关键是能通过方法学验证。
huacai
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〓猪哥哥〓
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原文由 21kgtan(21kgtan) 发表:
方法虽然可以这样设置,但是如果一开始就高浓度有机相,高到要分离的各组分都被洗脱下来,那样根本达不到分离效果,而且也没有再往低浓度走的必要了;如果不够高,要分离的组分没被洗下来,那你往低浓度跑,也没法洗脱。

所以我认为真正检样时这样做不行



我也同意这个观点,如果最初始就是高比例的有机相,很多成分就已经被洗脱出来了。后面更换小比例有机相,可能已经没有成分被洗脱出来,效果还不如等度。
当然有些成分也不完全符合有机相比例加大,保留时间减小,对于此类成分倒是可以试一试该方法
cjacksonn
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十分感谢大家的热心帮助。。
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2010/7/15 17:37:41 Last edit by cjacksonn
有水有渝
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实践是检测真理的唯一标准,楼主有这个想法为什么不试一下看看BC能不能分开呢?
pandora98
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原文由 cjacksonn(cjacksonn) 发表:
举例说明吧!
比如我这个样品里面有3个峰,A\B\C。按常规流动相0-20%,检测100min。A出峰时间10min,B出峰时间70min,C出峰时间71min。目标峰是B

这样的话我想缩短出峰时间、但又要把B和C分开(B和C靠得很近),请问怎么选择流动相?

我的思路是,由20%-0,20%能很快把A峰冲出来,同时,B和C在柱内推进了一段位移,这是浓度已经降到了较低浓度,有充分的机会来把B\C拉开,因为B和C之前有一段位移,所以后面B和C出柱的时间可能就较快。

我的愚见,不知对否!

你的这种情况,起始就是20%,然后恒流一段时间,然后再梯度,这样岂不是更好??
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