1)标准氨基酸溶液配制:0.3mmol/L 溶液。称取 xx mg 氨基酸......
(2) pH5.4醋酸缓冲液配制:,2mol/L 醋酸缓冲液:量取86mL 2mol/L 醋酸钠溶液,加入14mL 2mol/L 乙酸混合而成。用pH试纸检查校正。
(3)茚三酮显色液:称取85mg 茚三酮和15mg 还原茚三酮,用10mL 乙二醇甲醚溶解。
(4)分别取0.3mmol/L 的标准氨基酸溶液0, 1.0mL 于试管中,用水补足至1mL。各加入1mL pH5.4,2mol/L 醋酸缓冲液;再加入1mL 茚三酮显色液,充分混匀后,盖住试管口,在100℃水浴中加热15min,用自来水冷却。放置5min 后,加入3mL60%乙醇稀释,充分摇匀。检测备用。氨基酸样品液:每毫升氨基酸含量0、50μg。生成的颜色在60min 内稳定,脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应呈黄色,应测定OD440nm