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主题：【求助】关于标准曲线重复性差

浏览0 回复8 电梯直达
liubinlu
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发表于：2010/08/05 19:40:35 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用的是安捷伦1200，用外标法测目标物含量，分了6个不同梯度以建立标准曲线，线性的，先后做了三次，结果三个曲线各不相同（斜率，截距均不同），尤其是浓度较低的前三个梯度，同样的浓度，峰面积却差别很大，这是怎么回事？急盼达人解答！谢过！
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liubinlu
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2010/8/5 20:46:28 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
比如最低浓度0.15ug/ml，三次曲线对应的的峰面积分别为33、45、100，这是咋回事呢？
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xue2009
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2010/8/5 21:00:38 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 liubinlu(liubinlu) 发表:
我用的是安捷伦1200，用外标法测目标物含量，分了6个不同梯度以建立标准曲线，线性的，先后做了三次，结果三个曲线各不相同（斜率，截距均不同），尤其是浓度较低的前三个梯度，同样的浓度，峰面积却差别很大，这是怎么回事？急盼达人解答！谢过！

这个问题不大，只要你测的样品浓度相差不大就行，单纯比较峰面积没有任何意义。
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有水有渝
xky0230699
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2010/8/5 23:27:59 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
手动进样还是自动进样，你把最低浓度溶液连续进6针，看一下精密度如何？
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liubinlu
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2010/8/8 22:06:57 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xue2009(xue2009) 发表:
原文由 liubinlu(liubinlu) 发表:
我用的是安捷伦1200，用外标法测目标物含量，分了6个不同梯度以建立标准曲线，线性的，先后做了三次，结果三个曲线各不相同（斜率，截距均不同），尤其是浓度较低的前三个梯度，同样的浓度，峰面积却差别很大，这是怎么回事？急盼达人解答！谢过！

这个问题不大，只要你测的样品浓度相差不大就行，单纯比较峰面积没有任何意义。


比如0.15ug/ml（最小浓度的点），响应值（峰面积）低至33，高至101，这可是标准品哦，做标准曲线的，峰面积差异这么大，对未知样品定量没有影响么？
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xue2009
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2010/8/8 23:08:48 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 liubinlu(liubinlu) 发表:
原文由 xue2009(xue2009) 发表:
原文由 liubinlu(liubinlu) 发表:
我用的是安捷伦1200，用外标法测目标物含量，分了6个不同梯度以建立标准曲线，线性的，先后做了三次，结果三个曲线各不相同（斜率，截距均不同），尤其是浓度较低的前三个梯度，同样的浓度，峰面积却差别很大，这是怎么回事？急盼达人解答！谢过！

这个问题不大，只要你测的样品浓度相差不大就行，单纯比较峰面积没有任何意义。


比如0.15ug/ml（最小浓度的点），响应值（峰面积）低至33，高至101，这可是标准品哦，做标准曲线的，峰面积差异这么大，对未知样品定量没有影响么？

你只要保证在同一体系下得到的工作曲线，对你的定量是没有太大的影响的，这也就是说，每测一次样就做一次工作曲线就行啦。
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duanjiezz
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2010/8/9 11:10:45 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
由于您样品浓度太低，为了得到较高的准确度，建议你把进样量加大，低点浓度做一个标曲，（0.15ug--1.5ug或者15ug这要根据相同进样量时相对高点的响应值来取定用1.5还是15）；高点浓度再做一个标曲，这样分段解决你的问题
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xyhdcm2002
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2010/8/9 11:33:15 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
增大进量量试试,也有可能是你进样有误差.
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liubinlu
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2010/8/9 19:29:50 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢大家！我先从自己操作找原因，看看结果如何！
衍生化是在试管中进行。很可能是往里加甲醛标液的时候，部分甲醛挂在试管壁上了，造成峰面积小
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2010/8/9 19:30:40 Last edit by liubinlu
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