主题:【讨论】SPE小柱,你对此了解有多少?

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小卢
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SPE小柱(固相萃取柱),你用过吗?

1.如果用过,你是在什么情况下用的呢?效果如何?

2.如果没用过,你认为会用在什么情况下吗?
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毛毛儿
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老多_小多
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zxhcnf
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SPE就是一根柱效很低的柱子,塔板数只有几十,我们开发过一个分析中药青蒿中的青蒿素的方法,传统的方法是,用石油醚等超声青蒿素样品粉末后直接进样,这种前处理方法基线不平、杂质干扰非常严重,而用了C18的SPE除杂后,基线平稳很多,杂质干扰也少了很多,回收率也高。用XB-C18柱进行分析时,总有一个紧挨着的杂质分不开,后来考虑到青蒿素上有苯环,苯基柱对带苯环的化合物有特殊的选择性,换上XB-Phenyl苯基柱后就分开了。
根据个人经验,通常在两种情况下需要使用SPE小柱,一是目标化合物浓度很低,需要富集、浓缩时;二是样品中杂质干扰严重,需要除杂时;
使用的原理主要有两种模式:一是保留目标化合物模式;二是保留杂质模式。保留目标化合物的模式用得最多,通常的程序是:
活化——母液淋洗——上样——合适的流动相洗去杂质(溶剂强度、流速和流动相体积很重要,防止把目标化合物洗脱下来)——合适的流动相洗脱目标化合物(溶剂强度、流速和流动相体积很重要,既要保证把目标化合物洗脱下来又尽量防止保留能力比较强的杂质洗脱下来)——停止,上样的这一步非常关键。
该帖子作者被版主 samanthalas3积分, 2经验,加分理由:感谢分享!
小卢
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原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
SPE就是一根柱效很低的柱子,塔板数只有几十,我们开发过一个分析中药青蒿中的青蒿素的方法,传统的方法是,用石油醚等超声青蒿素样品粉末后直接进样,这种前处理方法基线不平、杂质干扰非常严重,而用了C18的SPE除杂后,基线平稳很多,杂质干扰也少了很多,回收率也高。用XB-C18柱进行分析时,总有一个紧挨着的杂质分不开,后来考虑到青蒿素上有苯环,苯基柱对带苯环的化合物有特殊的选择性,换上XB-Phenyl苯基柱后就分开了。
根据个人经验,通常在两种情况下需要使用SPE小柱,一是目标化合物浓度很低,需要富集、浓缩时;二是样品中杂质干扰严重,需要除杂时;
使用的原理主要有两种模式:一是保留目标化合物模式;二是保留杂质模式。保留目标化合物的模式用得最多,通常的程序是:
活化——母液淋洗——上样——合适的流动相洗去杂质(溶剂强度、流速和流动相体积很重要,防止把目标化合物洗脱下来)——合适的流动相洗脱目标化合物(溶剂强度、流速和流动相体积很重要,既要保证把目标化合物洗脱下来又尽量防止保留能力比较强的杂质洗脱下来)——停止,上样的这一步非常关键。


这里的除杂是不是用吸附的方式啊?
毛毛儿
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原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
SPE就是一根柱效很低的柱子,塔板数只有几十,我们开发过一个分析中药青蒿中的青蒿素的方法,传统的方法是,用石油醚等超声青蒿素样品粉末后直接进样,这种前处理方法基线不平、杂质干扰非常严重,而用了C18的SPE除杂后,基线平稳很多,杂质干扰也少了很多,回收率也高。用XB-C18柱进行分析时,总有一个紧挨着的杂质分不开,后来考虑到青蒿素上有苯环,苯基柱对带苯环的化合物有特殊的选择性,换上XB-Phenyl苯基柱后就分开了。
根据个人经验,通常在两种情况下需要使用SPE小柱,一是目标化合物浓度很低,需要富集、浓缩时;二是样品中杂质干扰严重,需要除杂时;
使用的原理主要有两种模式:一是保留目标化合物模式;二是保留杂质模式。保留目标化合物的模式用得最多,通常的程序是:
活化——母液淋洗——上样——合适的流动相洗去杂质(溶剂强度、流速和流动相体积很重要,防止把目标化合物洗脱下来)——合适的流动相洗脱目标化合物(溶剂强度、流速和流动相体积很重要,既要保证把目标化合物洗脱下来又尽量防止保留能力比较强的杂质洗脱下来)——停止,上样的这一步非常关键。

解释得很详细!谢谢分享宝贵知识!
快乐
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原文由 小卢(luxw) 发表:
原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
SPE就是一根柱效很低的柱子,塔板数只有几十,我们开发过一个分析中药青蒿中的青蒿素的方法,传统的方法是,用石油醚等超声青蒿素样品粉末后直接进样,这种前处理方法基线不平、杂质干扰非常严重,而用了C18的SPE除杂后,基线平稳很多,杂质干扰也少了很多,回收率也高。用XB-C18柱进行分析时,总有一个紧挨着的杂质分不开,后来考虑到青蒿素上有苯环,苯基柱对带苯环的化合物有特殊的选择性,换上XB-Phenyl苯基柱后就分开了。
根据个人经验,通常在两种情况下需要使用SPE小柱,一是目标化合物浓度很低,需要富集、浓缩时;二是样品中杂质干扰严重,需要除杂时;
使用的原理主要有两种模式:一是保留目标化合物模式;二是保留杂质模式。保留目标化合物的模式用得最多,通常的程序是:
活化——母液淋洗——上样——合适的流动相洗去杂质(溶剂强度、流速和流动相体积很重要,防止把目标化合物洗脱下来)——合适的流动相洗脱目标化合物(溶剂强度、流速和流动相体积很重要,既要保证把目标化合物洗脱下来又尽量防止保留能力比较强的杂质洗脱下来)——停止,上样的这一步非常关键。


这里的除杂是不是用吸附的方式啊?


一种是吸附目标物,把杂质用淋洗液洗掉; 另一种是吸附杂质,把目标物洗脱下来,备用。
雾非雾
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现在农残检测通行的方法都是用SPE柱来做净化的,还不错。
samanthalas
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小卢
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原文由 samanthalas(samanthalas) 发表:
处理血浆样品也常用到spe小柱

是的,不过一般处理血浆的第一步是离心!
小卢
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记得一次使用是处理鬼臼毒素样品,为了验证是否可以重复使用,我还用使用过的小柱做实验,结果相差很大!
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