主题:【讨论】色谱柱冲洗方面的几个问题

浏览0 回复95 电梯直达
小卢
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色谱柱使用完毕后就是冲洗色谱柱,大家一般是怎么冲洗的呢?

1.我们一般是:先冲洗水,然后再冲洗甲醇或乙腈。大家也这样吧?
2.冲洗水或甲醇时的流速、时间控制在多少呢?是和实验时一致还是变小呢?
3.是水冲洗的时间长还是甲醇长呢?
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samanthalas
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1,在含有缓冲盐流动相的使用情况下,我和楼主操作的差不多啊,先水后有机的原因是,首先要除去缓冲盐,然后再用有机相冲柱子以除去强保留物质和其他杂质(反冲)。另一个原因:毕竟绝大多数C18柱是不能长时间使用水流动相的,用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。另外水保存色谱柱容易长菌。当然冲柱子不一定是纯水,可以是高比例的水吧。
2,流速大些,时间就可以短些,反之,流速小,那么时间就要长点。流速和实验时一致还是变小呢?这个请高人来回答一下。时间长短,肯定要根据冲洗的目的----是日常维护还是已经污染的柱子。

大家有什么不同意见?
小卢
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小s的
第一条,表示认同,我也是这么做的!
第二条,哈哈,又提出一个疑问来了!
huaibeijiayuan
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1,在含有缓冲盐流动相的使用情况下,我和楼主操作的差不多啊,先水后有机的原因是,首先要除去缓冲盐,然后再用有机相冲柱子以除去强保留物质和其他杂质(反冲)。另一个原因:毕竟绝大多数C18柱是不能长时间使用水流动相的,用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。另外水保存色谱柱容易长菌。当然冲柱子不一定是纯水,可以是高比例的水吧。
2,流速大些,时间就可以短些,反之,流速小,那么时间就要长点。流速和实验时一致还是变小呢?这个请高人来回答一下。时间长短,肯定要根据冲洗的目的----是日常维护还是已经污染的柱子。

大家有什么不同意见?

其实用分析样品的流速冲洗就可以了,流速的快与慢是要看柱压
快乐
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1,在含有缓冲盐流动相的使用情况下,我和楼主操作的差不多啊,先水后有机的原因是,首先要除去缓冲盐,然后再用有机相冲柱子以除去强保留物质和其他杂质(反冲)。另一个原因:毕竟绝大多数C18柱是不能长时间使用水流动相的,用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。另外水保存色谱柱容易长菌。当然冲柱子不一定是纯水,可以是高比例的水吧。
2,流速大些,时间就可以短些,反之,流速小,那么时间就要长点。流速和实验时一致还是变小呢?这个请高人来回答一下。时间长短,肯定要根据冲洗的目的----是日常维护还是已经污染的柱子。

大家有什么不同意见?


用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。这个纠正能力应该有限吧。
samanthalas
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1,在含有缓冲盐流动相的使用情况下,我和楼主操作的差不多啊,先水后有机的原因是,首先要除去缓冲盐,然后再用有机相冲柱子以除去强保留物质和其他杂质(反冲)。另一个原因:毕竟绝大多数C18柱是不能长时间使用水流动相的,用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。另外水保存色谱柱容易长菌。当然冲柱子不一定是纯水,可以是高比例的水吧。
2,流速大些,时间就可以短些,反之,流速小,那么时间就要长点。流速和实验时一致还是变小呢?这个请高人来回答一下。时间长短,肯定要根据冲洗的目的----是日常维护还是已经污染的柱子。

大家有什么不同意见?


用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。这个纠正能力应该有限吧。

及时就有效,不及时就无效。
ainuonuo
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小卢
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这么说有机系冲洗除了为了保存色谱柱还有修复色谱柱的功能啦?!
Vigorous
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用一些特殊的溶剂冲洗色谱柱确实可以修复一些柱子的问题!我一般冲洗都是看我走的样品及所用的流动相来确定用大比例水还是大比例有机相来冲!
Vigorous
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仪器信息网确实让我们长不少见识!我该多向大家学习学习!
阿宝
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对于C18柱子来说,我们用完一般是用95%的甲醇冲上半个小时
不建议用高水相长时间冲反相柱子
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