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我的柱子我做主——反面典型,切勿模仿!!
题记本人在校学生,由于老板(我不说大家也懂)。。。
所以。。。狠下心,花费血本,私人购买了两根柱子~
下面讲讲我个人的一些操作~
严正声明:反面典型,切勿模仿!!流动相的配置
1. 大家都说,
液相用水,需要使用双蒸水,我觉得没有必要。
2. 我一般用重蒸水,我个人认为,蒸一次差不多了,完全没有问题。
3. 有时候重蒸水都没有,我就买点娃哈哈纯净水,这个还是很好用的。
4. 我曾经冒出这样的念头:干脆用自来水算了,由于自来水确实比较脏,最后还是打消了这个念头。
样品的处理
1. 开始的时候,我是用0.45的滤头进行过滤的,这就足够了。
2. 后来,人懒了,加上样品多,有些样品量也小,慢慢就不滤了。
3. 我们经常用到开放ODS,从开放ODS柱洗脱的样品,没有过滤的必要。
4. 有些难溶性化合物,这个还是要规矩地操作,最好用流动相溶解。
柱子的冲洗1. 我有时候加点缓冲盐,比如磷酸缓冲盐系统,这个,用不含缓冲盐的流动相冲一冲,然后甲醇冲柱就可以了。至于好多人说的,必须含水多少多少,必须比例多少多少,我觉得完全没有必要。缓冲盐,一般只要用到含水的系统(含水量大于等于流动相的含水量就行),很快就能冲出来,根本不影响,因为它不保留。
2. 我有时候加点乙酸甲酸一类的,这个,直接用甲醇冲柱就可以了,根本不需要先用水冲,因为甲醇很快就能把甲酸乙酸洗脱出来。
3. 如果是单纯的甲醇水或者乙腈水,如果心情一般,或者有更紧要的实验,我直接就不冲柱了(最长的一次,放了一个月,然后取出来,接着平衡,照样用)。
4. 至于在一些贴子里见过的,不宜用纯水冲,我是赞成的。对于不宜用纯甲醇冲,必须含一定量水,我也觉得没有必要。这些理论,说一说可以,实际操作中,该怎么样就怎么样吧。
后续补充说明
1. 我不是不懂色谱柱的保养、维护等等,我只是觉得,没有必要如此“小题大作”;
2. 我不是不懂液相、色谱柱等等相关的理论,我只是觉得,理论要结合实际,不然,它仅仅只是理论而已;
3. 我不是不懂这些都是前辈们不停地摸索才总结出来的宝贵经验,我只是觉得,没有必要将这些经验“神秘化”;
4. 我始终坚定不移地认为,色谱柱本身整体质量的好坏,是影响其性能的因素之一,但不是最重要的因素;
5. 我始终坚定不移地认为,样品的好坏,对于色谱柱性能的影响,是摆在第一位的;
6. 我始终坚定不移地认为,保养维护是影响色谱柱性能的一方面,但相对于样品的好坏,它绝对是次要的;
7. 我始终坚定不移地认为,色谱柱,只是一根色谱柱;色谱柱,没有传说中的那么“娇贵”。