主题:【讨论】HILIC色谱柱的方法开发及经验交流(附HILIC使用方法)

浏览0 回复87 电梯直达
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continuum
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原文由 hgxbo(hgxbo) 发表:

有机相在60%以下很难形成hilic模式


看厂牌

我看过建议最低是40%有机相的

另外现在为了分离早无所不用

最近才看了别人发表的 HILIC跑 90 -》10 跟 60-》15

不过好像是 mix mode HILIC

HILIC还好搞 新support跟mix mode的管柱比较难搞

上次跑 Zr-C18 。。。一跑分析物被column吃的无影无踪

mix mode像 obelisc , zic-hilic这些有时也要多花点时间。。有时甚至要涵盖pH的梯度

最近跑polymer base的mix mode HILIC一直给我莫名其妙跑一半暴压力。。。。很无言
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2013/5/29 12:56:16 Last edit by continuum
abcde
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原文由 frappuccino(frappuccino) 发表:
提供MRM条件

举例:
Parathion  CAS 56-38-2 C10H14NO5PS  母离子 291.033 
ESI+     
母离子          子离子      CV        CE
291.9            236          30        14
291.9              110          30        33

UPLC条件
0min  2%甲醇+0.1%FA      ————10min  100%甲醇

色谱柱 :waters UPLC BEH C18 (2.1*100mm,1.7um)  流速0.45ml/min
柱温 40度 

出峰时间  6.44min 


什么型号的质谱,检出限达到多少?

我用UPLC-premier XE做,灵敏度很低
hujiangtao
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sukiliang
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用HILIC做氨基糖苷类,有机相用甲醇的话没有乙腈那么好!
jay1
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今天用HILIC走几个极性特别大的化合物峰形很不好,可能是没有把甲醇换成乙腈的原因...有时候们也会用常规的C18柱然后换氨水走,效果也不错...
BEH HILIC 与HILIC的区别主要在哪呢,请高手指教啊...
hujiangtao
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erge
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我们用过Waters的,一般用该柱子都是用95%到50%的ACN,为什么不能用95%到0%的ACN,5%到95%的水啊?哪位老师能说说HILIC柱子的流动相使用范围以及原因吗?

另外,是不是不同的厂家流动相的范围也不一样呢?
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2013/7/8 23:04:31 Last edit by lihouquan
erge
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原文由 zhc609(zhc609) 发表:
我们基本上两三天就用一次,做三聚氰胺和三聚氰酸,偶尔做一下链霉素。百草枯等。型号是waters的。感觉很稳定的。每次用完都用50%的乙腈水清洗一下,最后换成90%的乙腈水保存。


为什么要先用50%的乙腈水清洗,最后换成90%的乙腈水保存呢?不能用90%甚至100%的水洗吗?
xinxin120
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能具体说说这个BEH填料是什么,有和没有又什么区别吗?

谢谢

原文由 frappuccino(frappuccino) 发表:
抛砖引玉

前言:
平日我常常都要使用HILIC色谱柱与其他色谱柱进行分离性能的对比。
久而久之,突然发觉现在使用HILIC柱的方法真是越来越多啊!
暮然回首,我的色谱柱的柜子里已经堆满了HILIC,而C18 只是被挤在了小角落里。
难道现在全球的研究方向已经突然转向了。。。。

赶紧连夜发帖与亲爱的液质版网友讨论。看看大家意见怎样?
顺便把自己使用HILIC的新的献上,起到抛砖引玉的作用。

1.  一直使用Waters 的HILIC较多,感觉质量还行,但是要小心waters 的HILIC是分两种类型的填料的 BEH HILIC和 HILIC。
很多waters 的销售都不清楚之一点。但是大家一定要注意,这两款的区别是很大的,保留的效果是不同的。

2. 费罗门公司的HILIC柱,感觉是小家碧玉型的,保留能力不是太强,但是清秀文雅, 峰型很好看。

3. HILIC的 流动相推荐使用乙腈。以后给大家细说。

4. 推荐使用乙酸铵, 这也以后再说。

5.不能使用100% 的乙腈,推荐使用到95%就行了。
  不能使用60%一下的乙腈。
  所以梯度范围小。但是足够用了。
sukiliang
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原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:

有没有哪位大侠用HILIC柱做氨基酸的啊


个人感觉HILIC柱不是那么好搞!也同样问过一些厂家工程师,他们也不怎么喜欢用这款柱!
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