主题：【第三届原创大赛】初生牛犊不怕虎，长出角来也未必怕狼——闲来无聊篇

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最近一直混迹于极限色谱柱版，看了很多学了很多，在此谢谢版面、版主还有各热心板友。
很多东西，我并不能赞同（也有不明白的）。这个贴子，要一一列出，并表达我的观点。
我是菜鸟，我说的，一般是错的，呵呵，请大家注意鉴别，不要被误导。
如果被我误导了，那我的罪过可就大了去了。

送大家几句话，是我关于液相的一些体会：

很多东西，其实没有必要，拿一些极低极低概率的事件来说事。
说是标准，其实是可有可无的标准；说是规程，其实是可轻可重的规程。
大家不要一味盲从，迷信理论，为什么？你盲从一些扯淡的东西有意思么？

闲来无聊之一：更换色谱柱的时候，需不需要开着流速
  某贴子内容：更换色谱柱的时候，不要关闭流速，至少也要开着小流速，以防气泡进入。
  本人观点：典型的给自己没事找事，完全没有必要打开流速。更换色谱柱，也就是几分钟的事，在这几分钟之内，管道的流动相会干么？管道的流动相会往泵回流么？就算是你用手去弹管道，里面的流动相也未必会被弹出来。
  退一万步讲，就算是进了气泡，也是个极小的气泡，这在平衡的过程中，很快就可以搞定，也不需要额外增加平衡的时间来处理。所以，你开也行，你关也行，为什么一定要说成打开流速？照这么个逻辑，那我还可以说，你开着流速，流动相挥散到空气中，增加了对环境的污染，你罪过大了！！

闲来无聊之二：液相样品，用什么溶解？
  某贴子内容：贴子讨论用于液相的样品，该用什么溶剂溶解
  本人观点：在可能的条件下，建议用流动相溶解。如果流动相溶得不好怎么办？没必要死死地一定用多少多少大体积的流动相去溶，溶解的体积越大，相当于原点越大，对分离度是有一定影响的。
  用甲醇溶得好，那就用甲醇溶，尽量用小体积就可以了。别跟我说，不用流动相溶解就不行，会损害色谱柱等等，扯淡。就算是会损害，那也是没办法的事。
  举个例子，你的定量阀25微升，你用甲醇，5微升就可以溶解了；你用流动相，30微升才能溶解，请问，你用什么溶解？你有本事你别选甲醇啊，你不是说会伤害色谱柱吗？别自己搬石头砸自己啊，多疼啊，唉哟唉哟。。

闲来无聊之三：管路中使用PEEK管时，哪些流动相不能使用？
  某贴子内容：有回贴说，使用强酸强碱的时候，可能会水解PEEK，所以不能用。
  本人观点：这是个彻头彻尾的扯淡。在做液相的时候，能使用多强的酸？能使用多强的碱？强到能水解PEEK管的地步？反问一句：连PEEK管都耐不住这种酸（碱），你的色谱柱能受得了？你的其它管道系统能受得了？
  PEEK管具有耐高温、机械特性、自润滑性、耐化学药品性(耐腐蚀性)、阻燃性、耐剥离性、耐疲劳性、耐辐照性、耐水解性等等特性。PEEK管是相当地“彪悍”，所以，当你觉得要考虑PEEK管是不是承受得了的时候，你应该在这之前，先考虑你的柱子能否受得了、先考虑其它管道系统能否受得了。

闲来无聊之四：PEEK管，应该怎么切？
  某贴子内容：贴子主要讨论怎么切PEEK管
  本人观点：PEEK管，如果切断，有专门的工具，用专门的工具，可以切得很平整（我用过）。但是，如果没有专用的工具怎么办？一是找人借找厂家，二是自己动手。自己动手用什么工具？刀片可以，剪刀可以，水果刀可以，甚至菜刀也可以，只要你能切得平整，就可以。条条大路通罗马，没人规定必须用专用的工具刀。
  只是有一点需要提醒，自己切的时候，要切平整，并不是那么容易。但是呢，你多练几次，就差不多了，下刀尽量做到：快、准、狠，基本就差不多了。如果有需要，没有专用的工具刀，可以来找我，我有一定的经验。
  那个贴子，可以锁贴了。

闲来无聊之五：色谱柱的柱效如何判断，必须用标准品吗？
  某贴子内容：回贴对此意见不一，有人认为需要，有人认为不需要。
  本人观点：色谱柱的柱效判断，完全没有必要用标准品。新买的柱子，经过一些简单的前处理，可以用一些纯的、或者较纯的、或者你对其组成比较清楚的样品进行“柱效检测”，看看峰形、压力就差不多了。完全没有必要按照厂家出厂时的做法，你来重复一遍。
  我想请问一下，你按照厂家的做法重新检测一定的目的是什么？意义何在？厂家的工作，你来做是么？你觉得你重新验证一次你会放心一些？如果你是这种心态，你其实还是不信任厂家，那你何必购买人家的色谱柱？另外，你有厂家检测的那些标准品么？那些标准品，有多少人有？有又怎么样，还是浪费时间、精力、人力、物力等等。
  排除人为因素，如果是柱子本身质量（柱压、柱效等等）有问题，厂家一般也会跟你调换，你有什么可担心的？

闲来无聊之六：样品和流动相，到底哪个对柱子污染大？
  某贴子内容：提问的形式出现，没有表达观点。
  本人观点：我一直坚定不移地认为，样品对于柱子的污染，是摆在第一位的；我一直坚定不移地认为，相对于样品，流动相对柱子的污染可以忽略不计。
  流动相，一般是可以人为控制的，处理得好的流动相，干净的流动相，基本不会污染色谱柱，我从来没看到有人用流动相跑柱子，把柱子跑坏的；样品，一般是不可控制的，有些样品，就算通过前处理，也还是一样的“脏”，污染在所难免，除非你不分析。
  有人说，流动相，加的缓冲盐啊或者其他一些物质，也有一些“彪悍”的，这是事实，但是这个不是主流，属于少数情况，少数情况，就得具体情况具体分析了。

闲来无聊之七：不同厂家的色谱柱与保护柱可以混用吗？
  贴子观点：提问的形式出现。
  本人观点：我认为，是可以混用的。保护柱，顾名思义，就是起的一种保护作用而已，一定程度上来说，它只对样品起着一个“过滤”的作用。有人说，它对样品也有一定的分离度，是的，这是事实。但是，那个人认为，相对于本柱来说，保护柱的这点分离效果，基本可以忽略。如果实在不放心，觉得不按配套使用不妥当，那就别用保护柱，直接用本柱做算了。当然，这个方法，过于大胆，不宜长期如此，一针两针也就算了。

闲来无聊之八：同一台液相，不同的人使用，色谱柱如何管理？
  贴子内容：提问的形式出现。
  本人观点：这个问题简单，作好实验记录就行。实验记录，应该包含的内容有：冲柱的压力（含流速、冲柱溶剂）、峰形记录（如果是公用柱子的话）、使用人、含日期、证人（不是特别重要，关系复杂的实验室除外）。有了这几条，基本上就不能出现问题了，至于使用的流动相是什么、使用过程中的压力如何波动等等，这些没有必要。
  实验记录，要的是最后的记录结果，过程在这里显得并不重要。这个记录，也就是几分钟的事，几分钟省掉很多不必要的麻烦（如交接出现问题，相互推托责任）。另外，在我们这里，如果不作记录，或者记录不完整，停止使用液相一次，多次出现同类问题，终身不得使用液相。

闲来无聊之九：流动相含有缓冲盐，如何清洗色谱柱？
  贴子观点：不仅仅是某一个贴子，很多贴子都提到，什么用水或者低浓度甲醇/水，冲洗半小时，一小时甚至很多个小时，然后用甲醇冲洗多久多久。
  本人观点：以上观点，纯属扯淡。第一点，流动相中含有缓冲盐，多久冲洗一次？如果你是连续用，你就可以一直用，不必冲洗，一直用到你不用为止，然后冲洗（前提：压力正常、流动相前处理正确）。
  第二点，怎么冲洗？流动相中含有缓冲盐，没有必要一定用多少多少低浓度的甲醇/水冲洗。比如，你原来是40%甲醇/水，你用不大于40%的不含缓冲盐的流动相冲洗就行了，为什么？比40%大，水相减少，有机相增多，缓冲盐可能析出损害柱子。
  第三点，一次冲洗多长时间？十几分钟已经足够了，缓冲盐，在柱子里根本就不保留，不保留的东西，你为什么要冲半小时？纯粹地浪费时间。最后，用甲醇冲柱就可以了，搞定。

闲来无聊之十：用什么数据指标来衡量色谱柱的寿命？
  贴子观点：部分人提到，用进针数来衡量。
  本人观点：衡量色谱柱的寿命，最通俗地说法就是：实验要求。当做出的数据满足不了你的实验要求了，你得不到应该得到的结果了，对于你这个实验来说，它已经寿终正寝。
  稍微理性化一点的说法就是：压力高了，柱效低了（包括峰形差了等方面），这个时候，可以经过一些处理（如再生），对行进行“挽救”，有可能继续使用，使它继续为你服务。
  用进针数来衡量，我不敢说这一定就是错的，但这种说法，绝对是欠考虑的，是有失妥当的。同类型的样品，用进针数来衡量，还勉强说得过去；如果是不同类型的样品（比如一个血液样品、一个化学药），差异太大，根本没有任何可以参考的意义。

闲来无聊之十一：柱子的最大流速是多少？
  贴子内容：提问的形式出现
  本人观点：不同的柱子，有不同的流速限制。普通的C18分析柱，一般最大也就是用1ml/min，0.8ml/min也用得比较多，大了就有可能把柱子冲坏了（其实我很大胆地认为，大点也是没事的，呵呵）。
  我们实验室有根手性柱（分析型），师兄做的时候，流速就用0.5ml/min，我问为什么这么低的流速，师兄说，说明书就这么写的。由于本人没有亲眼所见，故此处只是一提，不作定论。
  半制备、制备型的柱子，流速可以更大，比如4ml/min、8ml/min、10ml/min，这些都比较常见。更大一点的，30ml/min不算大流速，呵呵。我们学校有个实验室有台制备，可达100ml/min（平时也就是20ml/min，因为太费流动相）。工业生产的，那就更大了，此处不讨论。
  另外，至于贴子中提到的泵能否承受的问题，一般不用考虑，这种情况很少见过。除非，你把制备柱接在分析液相上，这时候，你就得考虑泵能否耐受了，呵呵。

闲来无聊之十二：色谱柱受到机械冲击或摔落，会如何？
  贴子观点：有人回贴提问，受到多大的冲击，会使柱效发生变化呢？
  王子衿观点：现在的电脑硬盘不知道是不是保护措施好了一点，在以前，你点背的时候，一次停电就有可能挂掉你真在进行格式化的硬盘；点正的时候，硬盘掉到地上捡起来也照样用。
  所以说，这个是概率问题，人摔一跤可能会残废，也可能没事爬起来继续跑。为了验证残废的几率，我们要多摔几次看看么？要不要换不同的姿势看看是不是一样的效果和几率？
  本人观点：对王子衿的观点深表赞同。这个跟测试汽车安全性能不是一回事，如果要跟汽车测试关联的话，我觉得测试色谱柱的耐摔性，跟测试用石头砸汽车，考察汽车的耐砸性，这才是相似的道理。

闲来无聊之十三：流动相走干后，如何最大程度挽救色谱柱？
  贴子观点：提问的形式出现，讨论如何挽救色谱柱。
  本人观点：流动相不够，液相跑空柱，这个，对色谱柱是没有损害的，大家可以放心。液相的泵，输送的是液相（流动相），它并不能输送气体，所以，当干了的时候，柱子是柱子，泵是泵，它们不再有多大的关系。如果一定要说他们有联系，那就是：它们仅仅是连接的。
  那对泵有没有损害呢？答案是肯定的。但是，这种损害到底有多强呢？一般而言，不是长期如此，不是长时间如此，影响不大，排排气泡，继续实验，不必放心上。如果哪台泵因为干了一次两次而出现问题了，那我只能说，你的泵质量也太次了，直接让它退休吧，不亏。

闲来无聊之十四：色谱柱两端的填料是一样的吗？
  贴子观点：两端填料不一样，反冲有可能将填料冲出。
  本人观点：说这种话的，可真会扯淡，高！！据我所知，柱子的装填，一般采用匀浆等密度，在高压下装填，请问一下，在这种条件下，怎么使两端填料不一样？
  行，你可以说，我不懂装填，是的，我承认我不懂装填。但是，我另外请问一下，柱子两端填料不一样的目的是什么？跟整个柱子填料一样，这种特殊真的有什么特殊的意义么？
  照这种说法，我也造一个说法吧：不光是柱头尾填料不一样，整个色谱柱，从柱头到柱尾，所用的填料都不一样，颗粒由大到小（或者由小到大，或者时大时小），为什么？就是为了显示我装柱技术的高超，这就是特殊意义。
  不要反问我，要是反问我，我会采用哲学的说法：世界上没有任何两颗粒径完全相同的填料，哦哦，无聊。。

闲来无聊之十五：反冲色谱柱，需不需要接检测器？会不会污染？
  贴子观点：不能接检测器，会污染检测器。
  本人观点：接不接检测器，完全由个人兴趣爱好决定，可接也可不接。至于接上检测器会被污染，这是地地道道地扯淡。请问一下，是怎么个污染法？从柱子中冲洗出来的脏东西，会在检测器停留？会被吸附在检测器壁上？
  这些脏东西，连色谱柱对它的束缚都能摆脱，连色谱柱对它的作用力都能克服，最后，它居然在对它没有任何作用力的检测器死吸附了，这是哪门子道理？你该不会说：他对检测器情有独钟吧？那我只能说：你对扯淡情有独钟，呵呵。
  我个人更倾向于接上检测器，这样的话，能不能将一些脏东西冲洗出来，可以从检测器上更直观地看到，一目了然。

看到一些贴子、回贴，看到一些人回复、讨论。。
真是令我痛心疾首，捶胸顿足。。。。
扯淡、忽悠、折腾、闹腾。。。。
唉，罢！罢！！罢！！！
闲来无聊到此为止！！