4.6.2 等度洗脱方式
4.6.2.1 按A泵的[pump]键,A、B泵将同时启动,pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积的流动相。
4.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
4.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,按4.5.6操作。
4.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声为<0.001mV时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。
4.6.3 梯度洗脱方式
4.6.3.1 以检验方法规定的梯度初始条件,按4.6.2项下方法平衡系统。
4.6.3.2 在进样前运行1~2次空白梯度。方法:按A泵的[run]键,prog.run指示灯亮,梯度程序运行;程序停止时,prog.run指示灯灭。
4.7 进样、采集运行
4.7.1 进样
4.7.1.1进样前按检测器[zero]键调零,按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点,再按一下 [查看基线] 按钮使其弹起。
4.7.1.2用试样溶液清洗注射器,并排除气泡后抽取适量。
4.7.2采集运行
4.7.2.1从菜单栏中选择 Control > Show Tray。或者,单击LC Setup Assistant窗口中的“Single Run”按钮或工具栏上的Single Run按钮。指定所需的项并单击Start按钮。
4.7.2.2 记录自动启动和关闭:单击LC Setup Assistant窗口中的Start/Shut Down按钮。在Start/Shut Down对话框中单击需要记录的Startup、Shut Down和 Startup/Shut Down中的任一按钮并确认或更改设置。单击Submit按钮进入待机对话框,该对话框停留在屏幕上等候执行设置。
4.7.2.3终止采集
4.7.2.3.1 延长运行时间:选择Control > Extend Run并输入添加到运行结束的时间值。要缩短采集时间,请指定一个负值。(对当前采集有效)
4.7.2.3.2 紧急停机
4.7.2.3.2.1 采集过程中,单击工具栏上的“Stop Run”按钮。接着就会出现一条消息,询问您是否“Abort the current run”,如果单击Yes,当前的数据采集就会终止。
4.7.2.3.2.2 如果在随后出现的消息上单击Yes, 剩余的采集就不会再运行,序列就会终止。如果单击No, 剩余的采集就会开始运行。
4.8更换流动相并排气泡
4.8.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中;
4.8.2 逆时针转动A/B泵的排液阀180°,打开排液阀;
4.8.3 按A/B泵的[purge]键,pump指示灯亮,泵大约以9.9ml/min的流速冲洗,3min(可设定)后自动停止;
4.8.4 将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。
4.8.5 如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽。
4.8.6 如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下连接管,放入废液瓶中,设流速为5ml/min,按[pump]键,冲洗3min后再按[pump]键停泵,重新接上柱并将流速重设为规定值。