主题:【求助】硅胶柱层析

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geebzbz
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找了很久,确实没发现有硅胶柱层析的版块,于是就到了最为相近的薄层色谱来求助了。
今天主要想咨询下大家几个经验性的问题:
1.硅胶在柱层析使用前,一定要活化吗?这样做有什么作用啊?
2.硅胶还有所谓的吸附溶胀的现象吗?或者1g硅胶在有机溶剂中的体积大概多少?好像这叫视密度吧?
3.湿法装柱一定要加压吗?因为没有加压泵,本来就会在常压下洗脱.
4.洗脱的流速大概多少?比如2个柱体积每小时啊,或者线速度之类的具有一定量化标准的参考值(我准备使用15cm*1.7cm的柱子),这个对于分离影响大吗?.
5.对于几个比较相近的物质,可以通过几次柱层析来实现分离吗?比如一次去掉1-2种,那么多次之后就能把杂质去掉了?
不好意思,刚接触这个,问题比较多,大家多多指教!想到几个就回答几个,先谢谢大家了!
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幽灵龙猫
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1不一定要活化,我曾经比较过,效果差不多,活化后能稍微好点
2硅胶吸附溶胀现象不明显,凝胶更明显一些,通常硅胶可以忽略
3湿法装柱不一定要加压,自然沉降即可
4这个自己掌握,别太快就行,快了容易影响分离效果
5对于相近的物质,上一次柱子分开可能性比较小,可以考虑进行PTLC,即制备薄层。
头像更新中,请稍候…
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有问题,还有分离纯化版块也可以~
哈哈哈,这算不算广告?
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原文由 幽灵龙猫(xiaodu2007693) 发表:
1不一定要活化,我曾经比较过,效果差不多,活化后能稍微好点
2硅胶吸附溶胀现象不明显,凝胶更明显一些,通常硅胶可以忽略
3湿法装柱不一定要加压,自然沉降即可
4这个自己掌握,别太快就行,快了容易影响分离效果
5对于相近的物质,上一次柱子分开可能性比较小,可以考虑进行PTLC,即制备薄层。

感谢这么全面、及时的回答!
如果溶胀不明显的话,那他的体积和质量怎样对应上?
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2010/11/5 9:05:46 Last edit by geebzbz
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有问题,还有分离纯化版块也可以~
哈哈哈,这算不算广告?

谢谢指导,以后也经常去分离纯化版块!
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有问题,还有分离纯化版块也可以~
哈哈哈,这算不算广告?

谢谢指导,以后也经常去分离纯化版块!

欢迎啊,我也是分离纯化版滴,嘿嘿
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1.硅胶在柱层析使用前,一定要活化吗?这样做有什么作用啊?
新买的不用活化的,活化后吗分离效果更好点。
2.硅胶还有所谓的吸附溶胀的现象吗?或者1g硅胶在有机溶剂中的体积大概多少?好像这叫视密度吧?
应该有点吧,不过这个在视觉上不太明显吧,没太仔细观察过。
3.湿法装柱一定要加压吗?因为没有加压泵,本来就会在常压下洗脱.
加压吗分离效果会好点,没有加压泵就手动加压呗,我们以前都是手动加压,后来嫌太累,做了个氮气加压的装置,省力,哈哈!
4.洗脱的流速大概多少?比如2个柱体积每小时啊,或者线速度之类的具有一定量化标准的参考值(我准备使用15cm*1.7cm的柱子),这个对于分离影响大吗?
流速会有影响,不过这个还要看你硅胶目数、载体高度、洗脱剂等等对分离效果都有影响的。
5.对于几个比较相近的物质,可以通过几次柱层析来实现分离吗?比如一次去掉1-2种,那么多次之后就能把杂质去掉了?
当然是可以,有钱的话买个制备色谱会更爽。
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2010/12/20 23:40:02 Last edit by foumy
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原文由 艺泰安邦(foumy) 发表:
1.硅胶在柱层析使用前,一定要活化吗?这样做有什么作用啊?
新买的不用活化的,活化后吗分离效果更好点。
2.硅胶还有所谓的吸附溶胀的现象吗?或者1g硅胶在有机溶剂中的体积大概多少?好像这叫视密度吧?
应该有点吧,不过这个在视觉上不太明显吧,没太仔细观察过。
3.湿法装柱一定要加压吗?因为没有加压泵,本来就会在常压下洗脱.
加压吗分离效果会好点,没有加压泵就手动加压呗,我们以前都是手动加压,后来嫌太累,做了个氮气加压的装置,省力,哈哈!
4.洗脱的流速大概多少?比如2个柱体积每小时啊,或者线速度之类的具有一定量化标准的参考值(我准备使用15cm*1.7cm的柱子),这个对于分离影响大吗?
流速会有影响,不过这个还要看你硅胶目数、载体高度、洗脱剂等等对分离效果都有影响的。
5.对于几个比较相近的物质,可以通过几次柱层析来实现分离吗?比如一次去掉1-2种,那么多次之后就能把杂质去掉了?
当然是可以,有钱的话买个制备色谱会更爽。


谢谢这么仔细的回答!
手动加压,怎么做的啊?对这种自己改进的实验方法,我非常感兴趣,望不吝赐教啊!
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最后一条,分离是一个慢过程,很难一步完成的,呵呵
阿三
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1不一定要活化,我曾经比较过,效果差不多,活化后能稍微好点
2硅胶吸附溶胀现象不明显,凝胶更明显一些,通常硅胶可以忽略
3湿法装柱不一定要加压,自然沉降即可
4这个自己掌握,别太快就行,快了容易影响分离效果
5对于相近的物质,上一次柱子分开可能性比较小,可以考虑进行PTLC,即制备薄层。
没有活化过 照样使用
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1.硅胶在柱层析使用前,一定要活化吗?这样做有什么作用啊?
新买的不用活化的,活化后吗分离效果更好点。
2.硅胶还有所谓的吸附溶胀的现象吗?或者1g硅胶在有机溶剂中的体积大概多少?好像这叫视密度吧?
应该有点吧,不过这个在视觉上不太明显吧,没太仔细观察过。
3.湿法装柱一定要加压吗?因为没有加压泵,本来就会在常压下洗脱.
加压吗分离效果会好点,没有加压泵就手动加压呗,我们以前都是手动加压,后来嫌太累,做了个氮气加压的装置,省力,哈哈!
4.洗脱的流速大概多少?比如2个柱体积每小时啊,或者线速度之类的具有一定量化标准的参考值(我准备使用15cm*1.7cm的柱子),这个对于分离影响大吗?
流速会有影响,不过这个还要看你硅胶目数、载体高度、洗脱剂等等对分离效果都有影响的。
5.对于几个比较相近的物质,可以通过几次柱层析来实现分离吗?比如一次去掉1-2种,那么多次之后就能把杂质去掉了?
当然是可以,有钱的话买个制备色谱会更爽。


谢谢这么仔细的回答!
手动加压,怎么做的啊?对这种自己改进的实验方法,我非常感兴趣,望不吝赐教啊!

柱子不是有磨口吗,可以买一个叫做加压头的玻璃器具,然后用一根软管连接,再买个双链球,接上就可以了,记着塑双链球和软管之间配个放气阀(我们以前叫放气阀),这样压力大了就可以手动缓慢放气。不至于一下子崩掉造成柱子里的硅胶开裂。
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