主题:【求助】两次硅胶柱层析收集的馏分中物质的有无不一样,为什么?

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jefful
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我第一次用硅胶柱层析,洗脱剂为:氯仿、甲系统,收集的洗脱馏分蒸发浓缩后,能在薄层板上检测到物质,但是由于上样量太多,后来的洗脱梯度没用。第二次分离的洗脱洗脱与第一次相同,但收集的馏分蒸干后用PBS缓冲液洗净,结果却在硅胶板上什么都检测不到。
我以为原因是点板的溶剂不同(一个是氯仿甲醇洗脱剂,一个是PBS缓冲液),所以用其中一个馏分做了两种溶剂的薄层层析,结果还是什么都没有。
求助各位高手,这是什么原因?如果在板上没有检测到物质,是否就说明该馏分中没有洗下东西?
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如果是同样的洗脱,应该不是没洗脱下来的问题,考虑其他原因吧
阿三
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