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液相色谱（LC）

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主题：【求助】蛋白检测波长什么时候是214nm，280nm？

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pingjiansi

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发表于：2011/01/27 08:49:30 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

为什么有时候检测蛋白用214nm，有时候用280nm啊？

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2011/1/27 13:17:53 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这个可能是根据各品种所含物质的是否有影响吧!

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qingqingcao

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2011/1/27 16:40:03 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我好象记得一些存在发光基团，例如含有苯环的氨基酸，苯环中能够和孤对电子发生π—n共轭，280nm有吸收，用到280nm的吧，一般是色氨酸、酪氨酸以及苯丙氨酸有吸收。214nm在紫外光比较靠前，属于末端吸收了吧。能量比较大。检测所有的吧。

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2011/1/27 16:44:45 Last edit by qingqingcao

pingjiansi

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2011/1/27 20:55:37 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

会不会与所用的流动相的不同有关系呢？论坛里我也搜了，没有相关的帖子，请大家答疑解惑，感谢。

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fff75

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2011/1/28 8:14:03 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

记得好像和组成蛋白的氨基酸有关系吧，普通的氨基酸最大吸收是214nm，好像是Trp最大吸收是280nm。

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2011/1/28 8:14:31 Last edit by fff75

leraine

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2011/1/28 8:59:53 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一般多肽都用215or280nm单波长检测

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bl21

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2011/1/28 10:03:01 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一般肽键在214都有吸收，所以214nm可以用来监测所有氨基酸。280nm是几个芳香族氨基酸的吸收峰，按照蛋白质序列，可以计算每个蛋白质在280nm的吸收系数，所以280nm的吸收是可以用来给蛋白质定量的。

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pingjiansi

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2017/9/15 11:07:17 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

哈哈，药典已经都改为214nm了，困惑了我这么多年

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夏天的雪

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2017/9/15 16:45:00 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 pingjiansi(pingjiansi) 发表:
哈哈，药典已经都改为214nm了，困惑了我这么多年

现在统一了，不用困惑了

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夏天的雪

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2017/9/15 16:45:07 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 pingjiansi(pingjiansi) 发表:
哈哈，药典已经都改为214nm了，困惑了我这么多年

现在统一了，不用困惑了

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