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液相色谱（LC）

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主题：【求助】求助WATERS大侠

浏览0 回复14 电梯直达

niraj

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发表于：2011/03/21 19:57:11 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

各位老师：

我们用waters2690分离单元，有人说在升流速的时候，比如冲洗色谱柱的时候，需要0.2的梯度慢慢升至1ml/ml。
另外，在切换流动相比例的时候，需要把流速缓慢停掉。

有没有老师可以权威地告诉我，是否需要这么做，并且我看面板上也有一个直接停掉流速的按钮啊，如果对系统有影响应该不会有这么一个功能吧。而且缓慢升流速也很麻烦，是不是有这个必要啊？我注意到我调整流速到1的时候它本身也是缓慢上升的啊。

另外，我这里的SOP规定在干排气的时候不需注射器抽取液体进行排气，而在WET排气的时候用注射器抽取，但是跟说明书和操作手册刚好弄反了。

请问，我该怎么做啊？这两种排气方式有差别吗？弄反后有什么坏处？

谢谢！

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2011/3/21 20:06:42 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

在切换流动相比例的时候，需要把流速缓慢停掉？
现在的仪器没有那么娇气，先设置好方法规定的流速，直接开泵或关泵就行了。

SOP规定在干排气的时候不需注射器抽取液体进行排气？
什么叫干排气，如果管路里已经充满流动相，直接排气就行了，不用注射器抽取。

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青橙

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2011/3/21 20:13:34 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

很想知道，什么是干排气和湿排气呢？请楼主解释一下吧~~

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niraj

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2011/3/21 20:23:52 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

呵，我措辞不当，见笑了。

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有水有渝

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2011/3/21 20:35:56 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 niraj(niraj) 发表:

呵，我措辞不当，见笑了。

我也是第一次接触这个概念，楼主是不是把两种方法弄错了，dry prime要注射器抽取流动相才对了。

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Sykren

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2011/3/21 20:41:46 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

wet prime 不需要用注射器，直接排气就行
dry prime 才需要用注射器辅助
一般都用wet prime，当走空后选择dry prime

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niraj

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2011/3/21 20:59:14 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

是啊，我看说明书也是说dry才抽，SOP却写的是WET进行抽，不知道有没有坏处。

另外请问，在WATERS2690需不需要缓慢改变流速？

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flyaway

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2011/3/22 11:34:03 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 niraj(niraj) 发表:
是啊，我看说明书也是说dry才抽，SOP却写的是WET进行抽，不知道有没有坏处。

另外请问，在WATERS2690需不需要缓慢改变流速？

关于Dry prime 和wet prime ，肯定是你们的sop 写错了。最好还是改过来，可以减少对脱气机的影响。

至于流速是否要缓慢升，和色谱柱有很大的关系。相对而言，C18的色谱柱比较耐用，压力的剧烈变化对色谱柱的影响较小，但是一些特别的柱子，例如葡聚糖凝胶的柱子，就需要缓慢提升流速，否则填料容易受损。

不过，如果你注意过就会发现，即便是开机后直接将流速设置为1.0ml/min，2690/2695/e2695 也会在一定的时间范围内将流速从0提升到1的，换言之，在设计时已经考虑到了流速变化对仪器以及色谱柱的影响。

（再补充一个有趣的地方：如果流速从0 直接变化为1，仪器的声音很有特色，因此有人说，2695是一台会唱歌的仪器。）

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2011/3/22 11:34:23 Last edit by flyaway

niraj

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2011/3/22 12:26:25 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 flyaway(flyaway) 发表:
原文由 niraj(niraj) 发表:
是啊，我看说明书也是说dry才抽，SOP却写的是WET进行抽，不知道有没有坏处。

另外请问，在WATERS2690需不需要缓慢改变流速？

关于Dry prime 和wet prime ，肯定是你们的sop 写错了。最好还是改过来，可以减少对脱气机的影响。

至于流速是否要缓慢升，和色谱柱有很大的关系。相对而言，C18的色谱柱比较耐用，压力的剧烈变化对色谱柱的影响较小，但是一些特别的柱子，例如葡聚糖凝胶的柱子，就需要缓慢提升流速，否则填料容易受损。

不过，如果你注意过就会发现，即便是开机后直接将流速设置为1.0ml/min，2690/2695/e2695 也会在一定的时间范围内将流速从0提升到1的，换言之，在设计时已经考虑到了流速变化对仪器以及色谱柱的影响。

（再补充一个有趣的地方：如果流速从0 直接变化为1，仪器的声音很有特色，因此有人说，2695是一台会唱歌的仪器。）

专家您好，我是否可以将你的建议理解为：

1，修改SOP成正确的方式
2，常规分析（C18柱）下不必要缓慢升降流速

另外，关于切换流动相比例上，这边是建议将流速将为0，并切换成你需要的比例和泵，然后升流速，有必要吗？我认为直接修改比例即可。

是不是不能，或者说不建议由100%的纯水直接切换至100%有机相（需要过渡）？因为我认为即使您当初是100%纯水，色谱柱在直接切换后也不会立即
全被取代为有机相的。

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