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cissie-1986
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发表于：2011/04/09 16:19:53 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我做的是药物的分离,之前标准品一直用甲醇溶解的,因为样品本身不太溶解在水中,结果出峰就一直有特别高大的溶剂峰,样品就参杂在溶剂峰里面,之后尝试了一部分甲醇一部分水溶解,结果紧紧跟着溶剂峰一起出来就基本分不开,我看过文献,说这个药的PK值在4左右，我尝试过磷酸、硼酸、Tris的各类pH的缓冲液，实在不知道该怎么办了。
希望大家给点建议，谢谢。
还有我用的Agilent的仪器，紫外灯似乎坏了，大家知道test 后mix 和max在什么范围是正常的吗？用了1500Hour 了
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2011/4/10 15:41:58 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的buffer里面加了SDS吗？
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2011/4/10 22:00:49 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 heguang(heguang) 发表:
你的buffer里面加了SDS吗？


加了20-60mmol/L但是浓度高的话柱子特别容易堵，而且老断流，基线也不平整，我用的260nm的检测波长，不知道为什么甲醇总是出现特别高的溶剂峰
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2011/4/11 9:50:23 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cissie-1986(cissie-1986) 发表:
原文由 heguang(heguang) 发表:
你的buffer里面加了SDS吗？


加了20-60mmol/L但是浓度高的话柱子特别容易堵，而且老断流，基线也不平整，我用的260nm的检测波长，不知道为什么甲醇总是出现特别高的溶剂峰


加SDS,最好滤膜过滤一下
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2011/4/11 9:53:32 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
还有一个问题,我认为甲醇应该没有什么紫外吸收的,你怎么会检测到溶剂峰,是不是别的东西的峰,你用的检测波长是多少?
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2011/4/11 9:56:15 Last edit by userwzy
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2011/4/11 9:57:22 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 userwzy(userwzy) 发表:
原文由 cissie-1986(cissie-1986) 发表:
原文由 heguang(heguang) 发表:
你的buffer里面加了SDS吗？


加了20-60mmol/L但是浓度高的话柱子特别容易堵，而且老断流，基线也不平整，我用的260nm的检测波长，不知道为什么甲醇总是出现特别高的溶剂峰


加SDS,最好滤膜过滤一下


我过了0.2微米的滤膜，而且我也觉得应该没有，但是我用我的仪器单走过甲醇也有很高的紫外吸收， 按道理应该封闭了啊，不知道为什么就是有很高的紫外吸收
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2011/4/11 10:16:25 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议,直接进一针甲醇,确定是否是溶剂峰,还有你用的甲醇是否污染
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cissie-1986
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2011/4/11 15:06:34 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
进过甲醇,就是有溶剂峰,应该没有污染实验室别人也都用得,作的好好的,我问过工程师,说是可能是我的缓冲环境就可能出现这种溶剂峰...不知道是不是这样呢
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2011/4/11 17:09:23 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个我也不知道了,换别的有机溶剂试一下吧
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2011/4/12 9:40:26 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
甲醇在紫外会有吸收，有时也会用它测定电渗。
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2011/4/12 14:18:12 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ericwong(ericwong) 发表:
甲醇在紫外会有吸收，有时也会用它测定电渗。
[/quote

但是我的都260nm了阿，正常不是220nm就封闭了吗?而且我的药一直在甲醇峰里存在
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