实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8041841今日发帖：86 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】流动相的比例变化会影响峰高和峰面积吗？请大家帮帮忙

浏览0 回复4 电梯直达
ronda
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2011/04/28 10:38:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好，我最近做了一个偏极性的样品，配置的浓度为7mg/ml， 在流动相为ACN(0.1%TFA):WATER(0.1%TFA)=50:50时，峰型正常。由于出峰时间较早，所以我把流动相的比例调整为ACN(0.1%TFA):WATER(0.1%TFA)=80:20，这时保留时间刚好合适，可是峰高和峰面积均增加了，变得比较胖，看上去像是过载了的样子。于是我降低进样浓度为0.7mg/ml，这时峰型又恢复正常。整个过程我疑惑的是我记得峰高和峰面积一般来说会和浓度和进样量有关，那么流动相的改变会导致保留发生变化的同时也会影响峰高和峰面积吗？
请大家帮我分析一下，非常感谢。
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
xhwy2010
xhwy2010
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/4/28 10:58:01 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是的，保留时间变长之后很多偏极性样品的峰会变胖变矮，但是峰面积有什么变化我没有研究过。我还有一个疑惑，楼主是用的反相柱吗？为什么有机相的比例增加反而样品保留时间变长？配置浓度7mg/ml，进样20ul，我想在一般色谱柱上是过载的。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
ronda
ronda
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/4/28 11:15:53 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你好，感谢你的回复！
我用的是C18反相柱。保留时间变长后峰变高了，峰面积也因此增加了。
我觉得极性样品在反向条件下应该是有机相比例越高越保留。对吗？
此外，我想弄清楚的问题就是在这个浓度和进样量下一般色谱柱会过载，可是我在用有机相比例低的时候，保留时间短，为什么没有过载现象出现，所以我也没调整浓度。为什么增加有机相比例后，保留时间增加，谱峰才显现出过载现象？所以我想是不是有机相的比例的改变会影响峰高和峰面积？（就是我的谱峰变得又高又胖是不是和改变流动相有关呢）
赞贴
1
收藏
0
拍砖
0
举报
xizhi
xizhi
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/4/28 14:36:47 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你是因为出峰早而把有机相的比例提高以延迟出峰才出现峰变得很宽，对于一个偏极性的样品你觉得正常吗，应该这样会出峰更早吧。我想知道到底是什么样的样品，或者它的溶解性是怎么样的
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
zhao1025
zhao1025
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/4/29 15:37:45 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xhwy2010(xhwy2010) 发表:
是的，保留时间变长之后很多偏极性样品的峰会变胖变矮，但是峰面积有什么变化我没有研究过。我还有一个疑惑，楼主是用的反相柱吗？为什么有机相的比例增加反而样品保留时间变长？配置浓度7mg/ml，进样20ul，我想在一般色谱柱上是过载的。


楼主还没回答啊 ？怎么可能 你前面的条件保留时间比后面有机相多的要早？

7mg/mL 实在是太浓了，0.1~1之间是比较合适的。
你还是把图传上来，我还是诧异，一开始的条件色谱图没问题。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】流动相的比例变化会影响峰高和峰面积吗？请大家帮帮忙
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁