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液相色谱（LC）

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主题：【求助】关于缓冲溶液的问题

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yukepotato

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发表于：2011/05/07 20:56:01 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

前一阵子再做一个项目时发现分别用用磷酸、高氯酸、磷酸二氢钾、庚烷磺酸钠配制的缓冲溶液效果不一致。只有用庚烷磺酸钠配制的缓冲溶液在分析该产品时出峰较为正常。现想咨询下各位前辈，在分析哪类产品时适用哪类缓冲盐，有没有诀窍啊，希望各位来谈谈经验！

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2011/5/7 21:13:30 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请问您用什么样品处理方法？缓冲溶液的作用是什么？

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阿宝

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2011/5/7 22:18:28 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

应该是液相色谱方面的吧？给你转到液相版面了

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supreme

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2011/5/8 10:35:08 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

选择缓冲液的步骤
1 .确定最佳分离状态时的流动相pH
2 .选择具有与流动相的pH相近的pKa 的缓冲液（即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液）
3 .确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收
（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液）
在色谱分析过程中常常需要使用缓冲盐来调节流动相的pH 值，缓冲盐的不当使用对色谱柱可能造成柱压升高、柱效下降以及使化合物的保留时间发生变化等影响：
1）柱压升高；
原因：缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出，堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙，阻碍流动相传质，引起柱压升高。
2）相同化合物的保留时间发生变化；
原因：如果没有冲洗干净就进行进样，色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化。
3）柱效下降；
原因：
i 有些缓冲盐会渗入到键合相的深处，损害硅胶基体，导致色谱柱键合相流失，柱床变松，柱效下降；
ii 凝结在键合相表面，使C18 碳链难以舒展，对物质的保留能力下降，导致柱效下降。因此用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗，水中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。

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