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主题：关于染料的激发和发射谱

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beddy
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发表于：2011/06/14 10:59:44 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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最近在对手里的几种染料扫描吸收和发射谱，其中一种是常用的SYBR GreenⅠ，给定的激发和发射波长分别为494nm和530nm；但是在扫描时我固定激发波长494nm时，它的发射峰的位置不是在530nm附近，而在500nm附近，这就与提供的不一致，不知道问题出在哪里，谢谢
推荐答案：老化验工回复于2011/06/15
相差30nm，倒是出奇的蓝移了。请问你测定染料光谱的溶剂条件与资料上的相同吗？例如，溶液的酸碱性，溶液中除染料以外还有其他可以配位的离子或分子等，它们影响了产生荧光的π-π*跃迁能级差，如果降低了共轭程度，可能跃迁能量就会增大，导致发射光谱蓝移。所以，你先检查一下溶液体系的影响，检查是否与资料一致。
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dahua1981
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2011/6/14 11:05:23 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般仪器都是有略微差别的，波长相差1nm左右还是可以接受的
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zlhuang0132
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2011/6/15 19:10:16 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
相差30nm，倒是出奇的蓝移了。请问你测定染料光谱的溶剂条件与资料上的相同吗？例如，溶液的酸碱性，溶液中除染料以外还有其他可以配位的离子或分子等，它们影响了产生荧光的π-π*跃迁能级差，如果降低了共轭程度，可能跃迁能量就会增大，导致发射光谱蓝移。所以，你先检查一下溶液体系的影响，检查是否与资料一致。
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老化验工
zlhuang0132
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2011/6/15 19:10:39 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你可以将条件逐项地改变，尤其是PH值（如缓冲溶液体系等），看看是谁在影响。如果你纯粹是用水溶解的染料溶液，那么资料上的方法是不是也用水直接溶解？
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2011/6/15 19:13:46 Last edit by zlhuang0132
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yd88886666
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2011/6/18 11:26:08 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做好查查资料！一般不会有这么远的差别！自己在根据激发和发射来做做，看看！
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2011/6/18 11:29:42 Last edit by yd88886666
手机版： 关于染料的激发和发射谱
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