多肽检测方法的建立_仪器信息网社区

xizhi

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2012/7/20 15:23:10 33楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

210nm左右的波长是没有问题的。
想知道你所说的不出峰，是一点峰都没，还是出现大包或者拖得很宽，而峰高极低，如果是这种情况你注意一下样品溶解后状态有没有点显粘稠，这就是样品没有完全溶解的结果，这样出的峰自然不明显。这种肽溶解时切记要先加乙腈再加少量水，尽量控制比例大于1.5:1（乙腈：水）。此外注意这条肽显出的酸碱性，高疏水性又显酸性的话就不要用TFA盐了，改用4G/L的醋酸铵盐，A、B相都是如此。
不知道你的样品其它杂质峰不能正常显示，如果都一点峰没有至少说明样品很可能没进到系统里，这个就要检查进样线路；样品如果进了系统而不出峰，除了前所说的原因，还有就是用高比例的有机相直接洗脱，如果能洗脱出来比较尖的峰，说明有机相比例还可以再提高；如果洗出来也看不到明显的色谱峰，建议改用CN柱试试。

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yishengweiyao

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2012/7/31 21:55:04 34楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢了，我这个样品等电点8左右，没有酸性D和E,样品确实很难溶解，是用甲酸溶解掉的。调节了各种有机溶剂的浓度进行分析，出的峰都是又矮又杂没法判断目标峰是哪个。甲醇、异丙醇都试过冲不出峰。
看来只有换CN柱子啦。希望能快点买来

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lyly1987

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2013/6/26 14:08:31 35楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

最近做多肽纯化时遇到点问题，想请教一下。我的多肽产品不溶于乙腈，微溶于水。尝试用甲醇和低浓度的乙酸铵来溶，效果也不是很好。多次纯化后产品中含有多种无机盐，由于产品在三氟乙酸等酸性条件下杂质会增多，因此考虑用水和乙腈脱盐纯化，但每次脱盐后都会有产品析出，请问有什么好的办法吗？不知道还能换什么流动相

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xizhi

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2013/6/26 20:50:50 36楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 lyly1987(lyly1987) 发表:
最近做多肽纯化时遇到点问题，想请教一下。我的多肽产品不溶于乙腈，微溶于水。尝试用甲醇和低浓度的乙酸铵来溶，效果也不是很好。多次纯化后产品中含有多种无机盐，由于产品在三氟乙酸等酸性条件下杂质会增多，因此考虑用水和乙腈脱盐纯化，但每次脱盐后都会有产品析出，请问有什么好的办法吗？不知道还能换什么流动相

不知道你的这条肽本身有没有显酸碱性，还是含有极性小的氨基酸比重特别大，在邮件里私聊

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