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主题：【求助】HPLC基线抬高，不规则波动

浏览0 回复16 电梯直达
laoshubanjia
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发表于：2011/08/04 10:55:16 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊


LC2010的仪器，流动相是甲醇-磷酸盐缓冲液=25:75 等度，柱子是平衡好了的。每次进几个样品开始是好的，但是走到第3个小时左右就出现基线上漂，抬高到另外一个平台，并且基线开始出现不规则小波动，这可能是什么原因，该怎么解决呢？几次做下来都是这样的情况
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2011/8/4 11:08:40 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相脱气了吗
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xizhi
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2011/8/4 11:10:54 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有没有注意到这段时间柱压的变化，以及废液出口的流速是否正常；对了你的磷酸的浓度是多少
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挣点钱
huxiaokang
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2011/8/4 11:40:12 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
环境温度变化（空调不要直吹LC）；流动相脱气；purge时间；柱压变化，等都需要考察一下。
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laoshubanjia
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2011/8/4 11:40:46 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:
流动相脱气了吗

没有，但是超声了，仪器有在线脱气功能，但不知道脱气效果如何
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laoshubanjia
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2011/8/4 11:43:09 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xizhi(xizhi) 发表:
有没有注意到这段时间柱压的变化，以及废液出口的流速是否正常；对了你的磷酸的浓度是多少

柱压没变，0.01mol/L，急啊，开始都是好好的，进几针就抬高基线，然后基线就不规律波动，做不了检测限啊
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xizhi
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2011/8/4 12:21:03 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
拆下柱子，管路用水冲个半小时以上试试
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无声潜伏
wang_ruyi
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2011/8/5 15:02:03 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
每次？如果每次都是走到第三个小时就基线变化应该考虑方法的问题了
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风中午荷
gyfehpg008
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2011/8/5 15:59:20 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能是样品不太干净，有东西污染和堵塞柱子，如果是这种情况，建议进样前过滤一下样品。
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yankunsu
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2011/8/5 17:20:21 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 laoshubanjia(laoshubanjia) 发表:


LC2010的仪器，流动相是甲醇-磷酸盐缓冲液=25:75 等度，柱子是平衡好了的。每次进几个样品开始是好的，但是走到第3个小时左右就出现基线上漂，抬高到另外一个平台，并且基线开始出现不规则小波动，这可能是什么原因，该怎么解决呢？几次做下来都是这样的情况


我认为是你的样品不干净，建议走梯度。也就是走完样品后，提高有机相的浓度，（进样前样品应过滤）多冲一会儿再走下一针，或者走完2针在搞有机相冲洗
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爱杰杰
zhchen1130
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2011/8/5 18:06:53 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
估计是样品把柱子污染了，样品里应该有强吸附物质，用80%到90%的甲醇冲冲试试。
    你以后编辑进样方法的时候可以在后面加一个高浓度有机相冲柱子的过程
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