主题:【已应助】如果用离子对试剂的话,怎么样的浓度比较合适呢?

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jessicaxin20
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关于离子对试剂的选择问题!

我的两种物质分离开要用到很极端的色谱条件,就是有机相甲醇只能加到3.5%左右,因为有机相的含量很低,所以出的峰很宽,目的峰要0.7MIN才能出完.
       
我现在用的流动相是20mM三乙胺,醋酸调PH到5.0,外加3.5%甲醇。
我的要检测的物质是UDP-氮乙酰葡萄糖胺,分子结构是,液相出峰图是,里面的第二个峰是我要的峰,就是8.7MIN左右出的峰。
       
我想问问大家,如果我想把峰型变好,峰宽变窄,几个物质完全分开的话,用怎么样的离子对试剂比较好一点。我看了下,我分离的物质是碱性的,如果用离子对试剂的话,怎么样的浓度比较合适呢?



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peterhello
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如果是为了液质联用开发方法,那么不能用离子对试剂和三乙胺。
现在的条件是等度的话可以换成梯度试一下
用的什么柱子?
rocket1121
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你的物质极性很大,所以需要很低的有机相,但是这个跟出峰宽度感觉好像关系不大。你可以换换柱子和以先更低比例的有机相再到较高比例的梯度液相条件试试
pazuzu
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查查文献吧,离子对不是很了解,只知道平衡要很久,很费时。做质谱应该不能用离子对试剂吧?做质谱的话也可以不分开。或者换换柱子,C8的试试。
dongcao588
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液质的话最好不要用三乙胺,离子抑制效应强,不好冲洗。碱性物质却调成酸性,是为了早出峰?或者用正离子检测所以调成酸性?我想你可能的思路还是调ph看是否能找到合适的ph值,减小峰宽。2.减小进样量增大流速。3.梯度。4.更换柱子。
kylabs
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液质联用是不能用离子对试剂的,只能用特殊的柱子或者条件。

ColumnCogent Diamond Hydride™, 4µm, 100A
Catalog No.70000-15P-2
Dimensions2.1 x 150 mm
SolventsA: DI water + 0.1% ammonium formate pH 7.2
B: 90% acetonitrile + 10% DI water + 0.1% ammonium formate pH 6
Mobile PhaseGradient:
Time%BTime%B
0.01007.070
3.0958.050
6.0709.050
Post Time5 min.
Flow Rate300 µL/min.
Compounds1. UDP glucose - the monitored MRM transitions were m/z 565 to m/z 323
2. UDP hexanolamine (internal standard) - the monitored MRM transitions were m/z 502 to m/z 258
(MRM � multiple reaction monitoring in LC/MS/MS)
DetectionESI � neg - Agilent 6410 Triple Quadrupole LC/MS
wuyuandaai
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看了你的谱图,我觉得慢慢优化你的梯度应该可以解决峰宽的问题!但是离子对试剂的浓度,我也没有用过
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