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主题：【求助】如何调梯度

浏览0 回复8 电梯直达
bendanxiaoan
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发表于：2011/08/13 14:33:53 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
安捷伦1200 安捷伦色谱柱分离九个标注品，已经分离成效果如图所示，但是无论我怎么努力，第五个峰仍然会拖尾，流速一直都是1ml/min，请教各位我该怎么调梯度？难道真要换流动相吗？
我所使用的梯度是
T                    甲醇%
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2011/8/13 15:12:33 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
根据你分离的东西，加点缓冲的盐 酸什么的
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有水有渝
xky0230699
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2011/8/13 16:06:12 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第5个峰的拖尾因子多少，样品的理化性质如何？
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sanbu830317
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2011/8/13 16:48:21 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个应该是样品本身的性质决定的，你可以考虑加下防拖尾的试剂试一下。如果是碱性物质加三乙胺，如果是酸性物质可以加醋酸铵，未知化合物加醋酸三乙胺，如果仍拖尾可以将三乙胺换成二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）。
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light2357302
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2011/8/13 20:06:45 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sanbu830317(sanbu830317) 发表:
这个应该是样品本身的性质决定的，你可以考虑加下防拖尾的试剂试一下。如果是碱性物质加三乙胺，如果是酸性物质可以加醋酸铵，未知化合物加醋酸三乙胺，如果仍拖尾可以将三乙胺换成二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）。


谱图上用的波长是200nm，而三乙胺在200nm有强烈吸收，很可能会造成本底浓度过高，掩盖目标峰，导致走出来的谱图是一条基线，甚至基线可能还会往下漂
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bendanxiaoan
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2011/8/14 12:20:30 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
第5个峰的拖尾因子多少，样品的理化性质如何？

第五个峰是：肌苷的峰，他的拖尾因子是1.645
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bendanxiaoan
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2011/8/14 12:24:16 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 light2357302(light2357302) 发表:
原文由 sanbu830317(sanbu830317) 发表:
这个应该是样品本身的性质决定的，你可以考虑加下防拖尾的试剂试一下。如果是碱性物质加三乙胺，如果是酸性物质可以加醋酸铵，未知化合物加醋酸三乙胺，如果仍拖尾可以将三乙胺换成二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）。


谱图上用的波长是200nm，而三乙胺在200nm有强烈吸收，很可能会造成本底浓度过高，掩盖目标峰，导致走出来的谱图是一条基线，甚至基线可能还会往下漂


我分的是核苷类的物质，上图有点看不清，不好意思，最大吸收波长是260nm，应该不会影响，但是我想的是用简单的流动相来分，甲醇水，或者乙腈水~·如果不行，那只能加缓冲盐了~
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爱杰杰
zhchen1130
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2011/8/14 19:05:37 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第五个峰拖尾应该不是梯度的问题，也应该不是检测波长的问题，可能是样品的性质，碱性物质容易拖尾，稍微加点三乙胺试试
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bendanxiaoan
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2011/8/18 8:48:57 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 爱杰杰(zhchen1130) 发表:
第五个峰拖尾应该不是梯度的问题，也应该不是检测波长的问题，可能是样品的性质，碱性物质容易拖尾，稍微加点三乙胺试试

您好，我加了三乙胺，但是有个很大的干扰峰，三乙胺应该不适合~~
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