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液相色谱（LC）

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主题：【求助】怎么选择洗脱梯度？

浏览0 回复6 电梯直达

season2012

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发表于：2011/10/08 14:09:45 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

本人最近要用高效液相色谱分离多种有机酸，但是查看各种文献都没有看到洗脱梯度，只知道要用到水相的比例很高。望各位前辈指教下一般分离物质时，洗脱梯度是怎么确定的，也可以以有机酸为例说明下。

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2011/10/8 15:07:14 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你先用等度洗脱，在调整比例试一试，若可以就不必要梯度！

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xizhi

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2011/10/8 15:16:57 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这个问题就涉及到检测方法的开发，除非是专门做这个的不然一般人只能从各个方面对方法进行摸索试探，再考虑洗脱梯度之前要考虑该有机酸的溶解情况，一般检测C18柱即可，如果水相太高就要考虑用正相体系或者CN柱；该酸的酸值适合什么样的缓冲盐。这些确立下来再尝试着对梯度的改进，如果能在纯水系里或者接近纯水系里溶解，就把梯度从100%水相开始，如果要加一定的有机相助溶就参照溶解的有机相比例调整一个接近的梯度，多进行几次尝试优化。讲的很粗略，希望有所帮助

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2011/10/8 18:36:52 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xizhi(xizhi) 发表:
这个问题就涉及到检测方法的开发，除非是专门做这个的不然一般人只能从各个方面对方法进行摸索试探，再考虑洗脱梯度之前要考虑该有机酸的溶解情况，一般检测C18柱即可，如果水相太高就要考虑用正相体系或者CN柱；该酸的酸值适合什么样的缓冲盐。这些确立下来再尝试着对梯度的改进，如果能在纯水系里或者接近纯水系里溶解，就把梯度从100%水相开始，如果要加一定的有机相助溶就参照溶解的有机相比例调整一个接近的梯度，多进行几次尝试优化。讲的很粗略，希望有所帮助

讲的很好，很有帮助。

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