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液相色谱（LC）
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主题：【求助】怎样设置洗脱梯度，才能去除干扰峰？？

浏览0 回复4 电梯直达
conniegeng
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发表于：2012/03/02 19:48:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用的是岛津LC-10ATVP色谱仪

流动相A是磷酸二氢钾，含0.8%THF，PH5.8.  流动相B是甲醇和已腈的混合（3:1）。

现在做三种氨基酸混标的标准曲线，但是出峰时间一张不是很稳定，第一个峰后段和第三个峰前段有干扰峰，我调整了十几次洗脱梯度了，改变不明显。第一次出峰时间在9min左右，第二次在14min左右，第三次在18min以后出峰.

最初洗脱梯度设置：

0-6 miin          B% :  25%

6-8 miin                      B% :  25%--42%

8-11 miin                    B% :  42%-42%

11-14 miin                          B% :  42%-50%

14-18 miin                            B% :  50%-75%

18min STOP

荧光检测波长  ：激发波长：340nm，发射波长：455nm
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2012/3/5 17:16:49 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
既然不行，就不要走阶梯的，试一试连续上坡的，比如0-15分钟从25%-40%
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蓝人
yuxiaofeng86
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2012/3/6 13:46:02 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
把谱图传上来大家看看

帮你找找问题
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老多_小多
emoc98311
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2012/3/7 16:06:03 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Blue-man(yuxiaofeng86) 发表:
把谱图传上来大家看看

帮你找找问题

3个氨基酸应该很好分离的，也不知道是不是楼主的试剂纯度不够造成
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安平
byron1111
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2012/3/29 22:46:34 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
梯度空白是否正常 ？
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手机版： 怎样设置洗脱梯度，才能去除干扰峰？？
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