植物性食品中多菌灵残留量的高效
液相色谱测定法
1 主题内容与适用范围
1.1 本方法用于测定粮食、蔬菜、水果中多菌灵的残留量。
1.2 本方法检出限为:0.01mg/kg。
2 原理
碱性条件下,试样中的多菌灵经甲醇提取后,经二氯甲烷萃取,二氯甲烷相减压干燥后的残留物用甲醇溶解,所制样液用高效
液相色谱仪测定。
3 试剂
本方法所使用的试剂除另有说明外,均使用符合国家标准的分析纯试剂和去离子水或同等纯度的水,建议采用国药集团上海化学试剂有限公司的试剂或者同等质量产品。
3.1 多菌灵标准品:纯度>98%
3.2 甲醇:色谱纯
3.3 二氯甲烷:色谱纯
3.4 氢氧化钠:分析纯
3.5 盐酸:分析纯
3.6 无水硫酸钠:分析纯
3.7 多菌灵标准溶液:准确称取适量标准品,用甲醇溶解,配制成1mg/mL的标准储备液。
4 仪器
4.1 高效
液相色谱仪(配紫外检测器)
4.2 电子天平:感量0.0001g
4.3 振荡器
4.4 旋转蒸发仪
4.5 超声波清洗机
5 样品
5.1 样品的制备
取适量新鲜或冷冻的空白或供试组织,绞碎并使均匀。
5.2 样品的保存
-20℃以下冰箱中储存备用。
6安全
本实验所用甲醇等有机溶剂具有毒性,操作时应戴一次性PE薄膜手套,在通风橱中进行。
7 分析步骤
7.1 提取
称取试样50.0g于具塞三角瓶中,加入100mL甲醇,加塞振荡10 min,加1mol/L氢氧化钠溶液10mL,振荡1小时。提取液过滤至蒸馏瓶中,于旋转蒸发仪上蒸干甲醇,用1mol/L盐酸20mL分次将浓缩液洗入分液漏斗,加入100g/L的氯化钠溶液30mL。用40mL二氯甲烷分两次萃取酸液,下层二氯甲烷相放入另一分液漏斗用25mL水洗,弃去二氯甲烷,水层并入原水层。用80mL二氯甲烷分两次萃取,二氯甲烷相经无水硫酸钠干燥后浓缩近干,用甲醇定容至5mL,过0.45 m滤膜,供高效
液相色谱分析。
7.2 空白试验
在不加样品的情况下,采用和7.1相同的步骤和试剂,制备全程序空白溶液。每批样品至少制备2个以上的空白溶液。
7.3 标准曲线的制备
准确量取适量多菌灵标准储备液,用甲醇稀释成浓度分别为0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5ug/mL的标准溶液,供高效
液相色谱分析。
8 测定条件
色谱柱:C18 柱,250mm×4.6mm(i,d),粒径5um。
流动相:甲醇—水(40+60,v/v),用前过0.45um滤膜。
流速:1.0mL/min
检测波长:281nm
进样量:20uL