原文由 yingyue88(yingyue88) 发表:
刚接触液质测定血样,遇到了很多问题;
采用正离子模式检测;1)空白干扰:用的是液液萃取,已排除是氮气吹干问题;流动相、空白血浆、水样代替血浆的空白均有干扰,更换各种溶剂、进样瓶后仍无改善,直接用甲醇打质谱的时候在药物浓度的确有点信号,但是因管路可能有点脏,不能说明问题;请问还有其他可能污染的问题或者仪器可能有问题吗?
2)低浓度不成线性:低浓度响应值都差不多,除了操作问题,有可能是仪器质谱参数选择不当的影响吗?
3)响应值不稳定:同一份样品,隔十来针后样品响应值下降一半多。色谱条件文献报导是用乙酸-乙酸铵和甲醇,因柱压较高,改成乙腈;试过乙酸-乙酸铵,响应值略降,为方便,直接改成甲酸;感觉不是酸性对其稳定性影响,是可能是质谱条件选择不对吗?应该怎么改善呢?
焦头烂额中,请大家多多指教!
原文由 chy57589893(chy57589893) 发表:原文由 yingyue88(yingyue88) 发表:
刚接触液质测定血样,遇到了很多问题;
采用正离子模式检测;1)空白干扰:用的是液液萃取,已排除是氮气吹干问题;流动相、空白血浆、水样代替血浆的空白均有干扰,更换各种溶剂、进样瓶后仍无改善,直接用甲醇打质谱的时候在药物浓度的确有点信号,但是因管路可能有点脏,不能说明问题;请问还有其他可能污染的问题或者仪器可能有问题吗?
2)低浓度不成线性:低浓度响应值都差不多,除了操作问题,有可能是仪器质谱参数选择不当的影响吗?
3)响应值不稳定:同一份样品,隔十来针后样品响应值下降一半多。色谱条件文献报导是用乙酸-乙酸铵和甲醇,因柱压较高,改成乙腈;试过乙酸-乙酸铵,响应值略降,为方便,直接改成甲酸;感觉不是酸性对其稳定性影响,是可能是质谱条件选择不对吗?应该怎么改善呢?
焦头烂额中,请大家多多指教!
从你的描述看,出现低浓度不成线性的原因仍然是因为空白干扰造成的,所以还是要解决空白干扰的问题,甲醇进样有信号,说明有污染,先好好洗下离子源,还有就是离子传输毛细管也要拆下来洗下,因为从你的第三问题看,好像是随着你的进样信号逐渐在下降,这应该不是质谱条件的问题,我感觉像是流动相或者是样品的原因,我觉得你应该考虑下流动相的盐浓度改变和样品前处理的改进(液液萃取的效果是不太理想的,会有较多基质和杂质对测定造成干扰的,考虑SPE吧)
原文由 yingyue88(yingyue88) 发表:原文由 chy57589893(chy57589893) 发表:原文由 yingyue88(yingyue88) 发表:
刚接触液质测定血样,遇到了很多问题;
采用正离子模式检测;1)空白干扰:用的是液液萃取,已排除是氮气吹干问题;流动相、空白血浆、水样代替血浆的空白均有干扰,更换各种溶剂、进样瓶后仍无改善,直接用甲醇打质谱的时候在药物浓度的确有点信号,但是因管路可能有点脏,不能说明问题;请问还有其他可能污染的问题或者仪器可能有问题吗?
2)低浓度不成线性:低浓度响应值都差不多,除了操作问题,有可能是仪器质谱参数选择不当的影响吗?
3)响应值不稳定:同一份样品,隔十来针后样品响应值下降一半多。色谱条件文献报导是用乙酸-乙酸铵和甲醇,因柱压较高,改成乙腈;试过乙酸-乙酸铵,响应值略降,为方便,直接改成甲酸;感觉不是酸性对其稳定性影响,是可能是质谱条件选择不对吗?应该怎么改善呢?
焦头烂额中,请大家多多指教!
从你的描述看,出现低浓度不成线性的原因仍然是因为空白干扰造成的,所以还是要解决空白干扰的问题,甲醇进样有信号,说明有污染,先好好洗下离子源,还有就是离子传输毛细管也要拆下来洗下,因为从你的第三问题看,好像是随着你的进样信号逐渐在下降,这应该不是质谱条件的问题,我感觉像是流动相或者是样品的原因,我觉得你应该考虑下流动相的盐浓度改变和样品前处理的改进(液液萃取的效果是不太理想的,会有较多基质和杂质对测定造成干扰的,考虑SPE吧)
你好,问题的确是如您所说的,我将乙腈改为甲醇-乙酸-乙酸铵缓冲液后,响应值比较稳定(虽有一定上升的趋势,但RSD基本可以接受);但问题又出来了:空白干扰时有时无,我低浓度的点(甚至中浓度的点)时有莫名的异常高值(甚至和高浓度一致,如1ng和100ng差不多),觉得非常费解,按理说如果是污染的话,响应值不应该那么大;已排除是流动相、处理中溶剂的干扰(因一次处理过程中,“干扰”或“污染”时有时无);初步怀疑是基质问题:我查了一下,磷脂碎裂的离子对184左右,而我的药物最后的子离子为184,初步怀疑是内源性物质干扰。但是觉得很奇怪的是,我既然用的是MRM选择离子对模式,不应该会出现这种干扰!
目前想尝试改变前处理方法,本来用的是乙酸乙酯,想换换别的萃取液,请问有什么好的建议可以供我借鉴一下吗?
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刚接触液质测定血样,遇到了很多问题;
采用正离子模式检测;1)空白干扰:用的是液液萃取,已排除是氮气吹干问题;流动相、空白血浆、水样代替血浆的空白均有干扰,更换各种溶剂、进样瓶后仍无改善,直接用甲醇打质谱的时候在药物浓度的确有点信号,但是因管路可能有点脏,不能说明问题;请问还有其他可能污染的问题或者仪器可能有问题吗?
2)低浓度不成线性:低浓度响应值都差不多,除了操作问题,有可能是仪器质谱参数选择不当的影响吗?
3)响应值不稳定:同一份样品,隔十来针后样品响应值下降一半多。色谱条件文献报导是用乙酸-乙酸铵和甲醇,因柱压较高,改成乙腈;试过乙酸-乙酸铵,响应值略降,为方便,直接改成甲酸;感觉不是酸性对其稳定性影响,是可能是质谱条件选择不对吗?应该怎么改善呢?
焦头烂额中,请大家多多指教!
从你的描述看,出现低浓度不成线性的原因仍然是因为空白干扰造成的,所以还是要解决空白干扰的问题,甲醇进样有信号,说明有污染,先好好洗下离子源,还有就是离子传输毛细管也要拆下来洗下,因为从你的第三问题看,好像是随着你的进样信号逐渐在下降,这应该不是质谱条件的问题,我感觉像是流动相或者是样品的原因,我觉得你应该考虑下流动相的盐浓度改变和样品前处理的改进(液液萃取的效果是不太理想的,会有较多基质和杂质对测定造成干扰的,考虑SPE吧)
你好,问题的确是如您所说的,我将乙腈改为甲醇-乙酸-乙酸铵缓冲液后,响应值比较稳定(虽有一定上升的趋势,但RSD基本可以接受);但问题又出来了:空白干扰时有时无,我低浓度的点(甚至中浓度的点)时有莫名的异常高值(甚至和高浓度一致,如1ng和100ng差不多),觉得非常费解,按理说如果是污染的话,响应值不应该那么大;已排除是流动相、处理中溶剂的干扰(因一次处理过程中,“干扰”或“污染”时有时无);初步怀疑是基质问题:我查了一下,磷脂碎裂的离子对184左右,而我的药物最后的子离子为184,初步怀疑是内源性物质干扰。但是觉得很奇怪的是,我既然用的是MRM选择离子对模式,不应该会出现这种干扰!
目前想尝试改变前处理方法,本来用的是乙酸乙酯,想换换别的萃取液,请问有什么好的建议可以供我借鉴一下吗?