主题:【讨论】关于样品液相检测中的干扰问题!

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penglin1984
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        这段时间我一直在做血浆样品的HPLC检测,对于期间遇到的一些问题想提出来跟大家讨论交流一下。
        做犬血浆样品的时候,在目标峰位置处有干扰,导致双峰或者峰形拖尾严重。对于此类问题,一般建议的解决方法有以下几种:      (1)微调流动相的比例,尽量将干扰峰跟目标峰分离,消除干扰。
              (2)调节流速,分离干扰峰跟目标峰。
              (3)调柱温。
              (4)调节流动相pH值。
              (5)样品过滤,或者经过固相萃取净化。
              (6)调节检测波长。
              (7)换流动相。
              (8)换柱子。
          不知道做过血浆样品的朋友有没有遇到同样干扰的问题呢?解决办法是怎样的呢?请给出交流意见,谢谢!
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zhaohua8011
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样品沉淀离心处理后,过滤膜,色谱柱最好连接保护住!
penglin1984
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原文由 zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:
样品沉淀离心处理后,过滤膜,色谱柱最好连接保护住!

我的血浆样品氮气吹干后流动相复溶,12000r/min离心10min后HPLC分析。因为200微升复溶,就不可能过滤膜了。这个干扰问题还是不太容易解决呢
houjjun
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我的血浆样品氮气吹干后流动相复溶,12000r/min离心10min后HPLC分析。因为200微升复溶,就不可能过滤膜了。这个干扰问题还是不太容易解决呢

什么意思,没看明白
有水有渝
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我的血浆样品氮气吹干后流动相复溶,12000r/min离心10min后HPLC分析。因为200微升复溶,就不可能过滤膜了。这个干扰问题还是不太容易解决呢

什么意思,没看明白


意思就是样品量太少,不可能再过滤了,最好能上一个图,同时楼主都按自己所列出的方法试验过了,都不理想吗?
houjjun
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oceanhu2009
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在样本处理时尽可能的浆内源性杂质除掉,常用的方法就是楼上那些朋友说的,不过因生物样品量少,处理繁琐使得回收率不高,因此要以最少的处理步骤来处理。沉淀然后高速离心是最常用的,对于这样处理后还有内源性干扰的话,可以针对干扰物来处理,例如往乙腈中加点酸或碱等,可起到良好效果。
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