主题：【分享】高效液相色谱法

  1．原理
  样品经有机溶剂提取、净化和衍生化反应后，浓缩液注人HPI。C仪，经色谱柱分离，分离出的组分依次进人荧光检测器(发射波长360 nm‘,激发波长245 nm)，产生相应的电信号，由记录仪记录响应信号，经微处理机自动计算及打印出样品中AFT含量(ng)。
    2．仪器
    HPI．C仪(具荧光检测器)。
    3。试剂
    ①硅镁型吸附剂：100～200目，350℃烘2 h，冷后装入密闭容器中，用前加水15％减活，平衡48h。可谇续傅用7天
②流动相：甲醇+O．01mol•I『’KH2P04(1+1)溶液配制后，经0．45 tan滤膜抽滤并脱气。
    ③层析柱，底层和上层为2．cIn厚的无水Na2S04，中层为0．4 g硅镁吸附剂，均以氯仿湿润。
    ④其他试剂参照薄层层析法。
    4．仪器工作条件
    ①具荧光检测器(激发波长245 nm、发射波长360 nm)。
    ②GAIN置16，Span置Max~
    ③柱：C18 10um(Radial pak cartridges)。
    ④流动相：甲醇+0．01tool／L KH2P04(1+1)。
    ⑤流速：1．3 mL／min。
    ⑥进样量：10“L。
    5．检测步骤
    ①样品提取与净化：准确称取样品10 g于具塞锥形瓶中，加50 mI。氯仿，振荡30 min，经过滤于层析柱中，用氯仿+正己烷(1+1)8 mI，，氯仿+甲醇(9+1)10 mL，淋洗除杂质，最后用20 mL丙酮+水(99+1)洗脱黄曲霉毒素，收集于烧杯中，在50℃水浴中挥干溶剂，再用氯仿
分次将残渣洗人2 mL具塞试管中，并于50℃水浴中通Nz吹干。
    ②衍生化反应：向具塞试管中加200弘I。正己烷，50uL三氟乙酸，将盖盖紧，充分混匀1 min，静置30 rain后用Nz吹干。加100uL流动相，充分混匀，待检。
    ③标准液的处理：取适量标准应用液，按样品处理方法萃取、净化和衍生化反应，定容，使AFTBl、AFTMl最后浓度均为O．1 ng•uL_。。
    AFT保留时间及标准色谱图：保留时间(rain)：AFTM，3．36，AFrG，4．72，A丌B16．00，FT G。1 n 1≯．AFTR 1 4 4n  AFT标准任谱图田园夕n一1

  6．说明
  ①本法应在1天内完成检测，否则结果偏低。
  ②层析柱中硅镁吸附剂应先用氯仿调为糊状加入。
    本文参考了国家标准物质网资料中心的相关资料