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液相色谱（LC）

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主题：【求助】高效液相泵压力不稳定

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mandy2012

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发表于：2012/08/03 16:45:05 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我是学高效液相不久的，最近碰到不顺利。今天用80%色谱甲醇冲柱子，基线较为平直，但是泵的压力不是很稳定，波动较大，改为30%的甲醇冲柱子之后，基线开始不平并会出现很高的峰，降下来之后还是不会很平整。以为是里面有气泡，就排了气泡，之后又打开排气阀快充了10分钟，还是没有解决问题，用100%的甲醇冲柱子，基线是平的，但是泵的压力还是不是很稳定，而且会变成是0,。以为是双蒸水不是很纯，后来换了买的桶装水，试了下，有峰出现，而且压力会增的较大。急，高手帮忙解决下问题啊！

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2012/8/3 17:02:47 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

先确认系统连接正常。

压力为0的时候观察过是否还有液体流出？如果压力为0流速仍然正常说明压力传感器或者显示界面有问题。如果没有流动相流出说明可能是管路断开和泵头上下单向阀都有气泡聚集（可能性更大）。这种情况下产生气泡的原因大致有三个：流动相没有超声脱气、过滤沉子污染、单向阀污染（没有清洗干净）。楼主可以先排除这几个问题。

在冲洗时如果有别的色谱柱也可以更换下色谱柱，排除下是不是色谱柱还有样品没有洗脱导致有峰出现。

希望有所帮助吧

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liufeilzu

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2012/8/3 17:13:37 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

泵的单向阀出问题了

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150

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2012/8/3 20:34:27 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 liufeilzu(liufeilzu) 发表:
泵的单向阀出问题了

单向阀的可能性很大漏液的可能呢？？

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dark_wzy

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2012/8/4 10:19:52 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

压力不稳的一个主要原因是系统里面有气泡，可以采用甲醇或乙腈对所有管路进行灌注排气，然后柱子也先用纯有机相进行冲洗一段时间之后再逐渐增加水相比例。

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海边

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2012/8/4 16:32:28 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 mandy2012(mandy2012) 发表:
我是学高效液相不久的，最近碰到不顺利。今天用80%色谱甲醇冲柱子，基线较为平直，但是泵的压力不是很稳定，波动较大，改为30%的甲醇冲柱子之后，基线开始不平并会出现很高的峰，降下来之后还是不会很平整。以为是里面有气泡，就排了气泡，之后又打开排气阀快充了10分钟，还是没有解决问题，用100%的甲醇冲柱子，基线是平的，但是泵的压力还是不是很稳定，而且会变成是0,。以为是双蒸水不是很纯，换了买的桶装水，试了下，有峰出现，而且压力会增的较大。急，高手帮忙解决下问题啊！

问题1.“打开排气阀快充了10分钟，还是没有解决问题”排气泡不允许这么长时间的，最多5分钟。
2.泵压不稳原因可能是单向阀的问题。
希望你能多学习基本知识，不要盲目操作！

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