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液相色谱（LC）

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主题：【求助】清洗洗柱子流速多少

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muzheng88

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发表于：2012/11/15 11:08:11 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如题，用了磷酸流动相，洗柱子流速为多少呢？哪些大虾能告诉我安捷伦1100系列洗针的详细过程。

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2012/11/15 11:17:29 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

清洗柱子流速为1.0ml/min。

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jiaodandan

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2012/11/15 18:11:42 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1100的进样针基本不用洗，清洗色谱柱就选用你检测样品时的流速，用20倍柱体积的冲洗液清洗你的色谱柱！

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liuwei10987

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2012/11/15 18:48:02 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

清洗磷酸时，先用大比例的水（比如90%水相）清洗20min左右，流速就用走样时的流速，然后梯度调为100%有机相保。

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houjjun

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2012/11/15 20:43:41 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

先用大10%的有机相清洗20min左右，再用100%有机相冲洗20分钟。流速用之前的流速就可以，如果色谱柱有污染，应适当调小流速

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hnteng

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2012/11/16 9:00:11 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 houjjun(houjjun) 发表:
先用大10%的有机相清洗20min左右，再用100%有机相冲洗20分钟。流速用之前的流速就可以，如果色谱柱有污染，应适当调小流速

　　　　赞同。

　　　　我一般用0.5 ml/min的流速。

　　　　就像环卫工人扫马路一样，速度快了，肯定扫不干净，特别是对于角落里的垃圾。速度太慢了，影响效率。

　　　　如果检测简单物质，比较干净的，我一般就是1 ml/min的流速。先用高比例水冲，然后再梯度到100％有机相。如果是比较复杂的的物质，先用高比例水冲长一些时间，一般是30分钟，然后再梯度到100％有机相。流速一般设为0.5 ml/min。

　　　　对于严重污染的柱子，挽救的措施之一是用低流速反复冲，通常是0.3ml/min。用这个方法把一根2006年的柱子成功救过来，至今还在使用。

该帖子作者被版主 nixiaolong加 3积分， 2经验，加分理由：解答详细，生动

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2012/11/16 9:04:44 Last edit by hnteng

houjjun

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2012/11/16 9:28:28 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 hnteng(hnteng) 发表:
原文由 houjjun(houjjun) 发表:
先用大10%的有机相清洗20min左右，再用100%有机相冲洗20分钟。流速用之前的流速就可以，如果色谱柱有污染，应适当调小流速

　　　　赞同。

　　　　我一般用0.5 ml/min的流速。

　　　　就像环卫工人扫马路一样，速度快了，肯定扫不干净，特别是对于角落里的垃圾。速度太慢了，影响效率。

　　　　如果检测简单物质，比较干净的，我一般就是1 ml/min的流速。先用高比例水冲，然后再梯度到100％有机相。如果是比较复杂的的物质，先用高比例水冲长一些时间，一般是30分钟，然后再梯度到100％有机相。流速一般设为0.5 ml/min。

　　　　对于严重污染的柱子，挽救的措施之一是用低流速反复冲，通常是0.3ml/min。用这个方法把一根2006年的柱子成功救过来，至今还在使用。

非常有道理，冲洗时一般是注意流速、冲洗时间、流动相成分及比例。流速和时间的乘积是冲洗的体积。冲洗的体积越大越好。如果体积一定时间越长越好