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主题：【求助】换迪马色谱柱后7P的峰形图只有5个峰，少了二个峰，请高手指教

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mikeliuqing

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发表于：2012/12/24 11:13:36 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我公司原来一直用月旭的色谱柱，测试的是7P，7个峰形图都很正常，一直都很正常，前几天买了一根迪马色谱柱之后就发现少了二个峰，有二个峰没有出来，而且出峰时间隔的比较开。二者的流动相都是用30%（水）：70%（乙腈），流速1.0。有哪位高手可以告诉我解决方法，用哪种流动相可以解决，为什么会少二个峰，是哪二个峰没有出来。

1、月旭色谱柱型号；AQ-C18，4.6*250MM Column 5-Micron（外观上比迪马粗一点，刚好可以放在恒温箱的凹槽内），正常的7P峰形图如下；

2、2、迪马色谱柱型号：C18(2) 250*4.6MM ，测试出来的7P峰形图如下（外观上看细一点，没有月旭的粗，放在恒温箱的凹槽内显得比较小。），不正常，少了二个峰。

3、月旭色谱柱和迪马色谱柱的外观如下。

如图1：迪马色谱柱，为防止加热时传递不到色谱柱，所以放在凹槽内还要用垫片加固。

如图2、3上、4面那根是月旭的色谱柱，比迪马的粗一些，放在凹槽内刚刚好。另外这二个色谱柱两端的筛板也不一样。这二者之间会不会有影响呢？

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2012/12/24 12:08:42 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

应该是不同厂家的色谱柱填料的极性不一致引起的样品在色谱柱的色谱行为的差异。
给我的感觉是，用迪马的色谱柱，另2P没有出现的原因是采集时间过短，延长采集时间可以找到另外两个色谱峰。
如果不想改变采集时间，而且在分离度可以的情况下，可以适当增大乙腈的比例。

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2012/12/24 15:36:39 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

非常谢谢楼上的回复。

另外我今天按照迪马那边给出的建议去测试，可结果还是不行。我把今天分别设置流量比例测试出来的结果都发出来，希望知道的大哥指教一下。谢谢。

我们所使用的是30%（水）：70%（乙腈）等度，起始流量控制是30%：70%。左下角还有一个泵控制，图片看不到全部的设置。我写出来给大伙参考一下。看看是不是泵控制流量设置的问题导致的。

如图1；起始流量30%（水）：70%（乙腈）