主题:【讨论】LC-MS/MS做方法学考察时LOQ和LOD严谨的做法应该怎样做???

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aghuru
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RT。

我们知道,在做色谱(气相液相)的方法学考察时,检测限和定量限比较严谨的做法是:先进一针标液,算信噪比,得出理论的检测限和定量限;然后再根据理论LOQ和LOD配制一个接近该浓度的溶液,进样6次算RSD和信噪比是否符合要求的;

但是质谱由于灵敏度经常变化,无法重现,今天该溶液信噪比是10,可能第二天再进样信噪比就变成20或者5了。所以上述的方法似乎在质谱上无法应用。

所以,特地在这里请教一下大家,LC-MS/MS的检测限和定量限大家都是怎么做的呢???有没有比较严谨的做法呢???
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sukiliang
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千层峰
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我做GCMS的检出限时重复进样7针,再算SD和RSD,

其实如果仪器状态稳定,连续检测同一标样,S/N差别不大。
johne0212
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LC/MS/MS做S/N比有几种不同的算法,通常我们使用的是下面两种,但是每种算法都是估测值,推荐你计算出来以后在去验证一下。
1.通过S/N去算

首先需要空白基质,然后在空白基质上添加3个尽量接近LoD浓度水平的被分析物。每个浓度水平平行分析2次,计算每次的S/N,然后以添加浓度为横坐标,S/N为纵坐标,进行线性回归,得到方程,当Y=3时计算的X值就是LoD,当Y=10时,X为LoQ。具体例子如下。

LoD & LoQHeightS/N
Spiked 3ppb-165.56
Spiked 3ppb-254.63
Spiked 6ppb-11614.81
Spiked 6ppb-21513.89
Spiked 8ppb-12018.52
Spiked 8ppb-22220.37
Cal Value(ppb)
LoD2.22
LoQ4.64


此做法,噪声的取值时间段有很大的人为干扰因素,所以噪声值人为影响比较厉害。

2. 第二种方法是通过连续测试空白基质或者含量很低的基质(测试次数大于等于6次),计算SD得到,公式为LoD=Mean(Blank)+3 SD, LoQ=Mean (Blank)+10SD。

此做法不仅仅只适用于色谱分析,并且可以应用到任何给定量分析结果的实验,比如ICP-OES,灰分,凯氏定氮和脂肪等测试。
该帖子作者被版主 zpf200312125积分, 2经验,加分理由:应助
zwyu
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mark

原文由 johne0212(johne0212) 发表:
LC/MS/MS做S/N比有几种不同的算法,通常我们使用的是下面两种,但是每种算法都是估测值,推荐你计算出来以后在去验证一下。
1.通过S/N去算

首先需要空白基质,然后在空白基质上添加3个尽量接近LoD浓度水平的被分析物。每个浓度水平平行分析2次,计算每次的S/N,然后以添加浓度为横坐标,S/N为纵坐标,进行线性回归,得到方程,当Y=3时计算的X值就是LoD,当Y=10时,X为LoQ。具体例子如下。

LoD & LoQHeightS/N
Spiked 3ppb-165.56
Spiked 3ppb-254.63
Spiked 6ppb-11614.81
Spiked 6ppb-21513.89
Spiked 8ppb-12018.52
Spiked 8ppb-22220.37
Cal Value(ppb)
LoD2.22
LoQ4.64


此做法,噪声的取值时间段有很大的人为干扰因素,所以噪声值人为影响比较厉害。

2. 第二种方法是通过连续测试空白基质或者含量很低的基质(测试次数大于等于6次),计算SD得到,公式为LoD=Mean(Blank)+3 SD, LoQ=Mean (Blank)+10SD。

此做法不仅仅只适用于色谱分析,并且可以应用到任何给定量分析结果的实验,比如ICP-OES,灰分,凯氏定氮和脂肪等测试。
suyirumo
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原文由 johne0212(johne0212) 发表:
LC/MS/MS做S/N比有几种不同的算法,通常我们使用的是下面两种,但是每种算法都是估测值,推荐你计算出来以后在去验证一下。
1.通过S/N去算

首先需要空白基质,然后在空白基质上添加3个尽量接近LoD浓度水平的被分析物。每个浓度水平平行分析2次,计算每次的S/N,然后以添加浓度为横坐标,S/N为纵坐标,进行线性回归,得到方程,当Y=3时计算的X值就是LoD,当Y=10时,X为LoQ。具体例子如下。

此做法,噪声的取值时间段有很大的人为干扰因素,所以噪声值人为影响比较厉害。

2. 第二种方法是通过连续测试空白基质或者含量很低的基质(测试次数大于等于6次),计算SD得到,公式为LoD=Mean(Blank)+3 SD, LoQ=Mean (Blank)+10SD。

此做法不仅仅只适用于色谱分析,并且可以应用到任何给定量分析结果的实验,比如ICP-OES,灰分,凯氏定氮和脂肪等测试。


大神在这里 学习了 一直想弄明白这个问题
goldendays
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请问第二种方法里,连续测试空白基质,是计算其噪音吗?然后计算6次进样的噪音的SD值?

原文由 johne0212(johne0212) 发表:
LC/MS/MS做S/N比有几种不同的算法,通常我们使用的是下面两种,但是每种算法都是估测值,推荐你计算出来以后在去验证一下。
1.通过S/N去算

首先需要空白基质,然后在空白基质上添加3个尽量接近LoD浓度水平的被分析物。每个浓度水平平行分析2次,计算每次的S/N,然后以添加浓度为横坐标,S/N为纵坐标,进行线性回归,得到方程,当Y=3时计算的X值就是LoD,当Y=10时,X为LoQ。具体例子如下。

LoD & LoQHeightS/N
Spiked 3ppb-165.56
Spiked 3ppb-254.63
Spiked 6ppb-11614.81
Spiked 6ppb-21513.89
Spiked 8ppb-12018.52
Spiked 8ppb-22220.37
Cal Value(ppb)
LoD2.22
LoQ4.64


此做法,噪声的取值时间段有很大的人为干扰因素,所以噪声值人为影响比较厉害。

2. 第二种方法是通过连续测试空白基质或者含量很低的基质(测试次数大于等于6次),计算SD得到,公式为LoD=Mean(Blank)+3 SD, LoQ=Mean (Blank)+10SD。

此做法不仅仅只适用于色谱分析,并且可以应用到任何给定量分析结果的实验,比如ICP-OES,灰分,凯氏定氮和脂肪等测试。
realtiger
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是先连续测试空白基质(测试次数大于等于7次),计算得到mean平均值;然后含较低目标物的基质(测试次数大于等于7次,与前面相同),计算得到SD,公式为LoD=Mean(Blank)+3 SD, LoQ=Mean (Blank)+ 6-10SD

原文由 goldendays(goldendays) 发表:
请问第二种方法里,连续测试空白基质,是计算其噪音吗?然后计算6次进样的噪音的SD值?

goldendays
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原文由 realtiger(realtiger) 发表:
是先连续测试空白基质(测试次数大于等于7次),计算得到mean平均值;然后含较低目标物的基质(测试次数大于等于7次,与前面相同),计算得到SD,公式为LoD=Mean(Blank)+3 SD, LoQ=Mean (Blank)+ 6-10SD

原文由 goldendays(goldendays) 发表:
请问第二种方法里,连续测试空白基质,是计算其噪音吗?然后计算6次进样的噪音的SD值?



谢谢 受教了
makfe
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原文由 johne0212(johne0212) 发表:
LC/MS/MS做S/N比有几种不同的算法,通常我们使用的是下面两种,但是每种算法都是估测值,推荐你计算出来以后在去验证一下。
1.通过S/N去算

首先需要空白基质,然后在空白基质上添加3个尽量接近LoD浓度水平的被分析物。每个浓度水平平行分析2次,计算每次的S/N,然后以添加浓度为横坐标,S/N为纵坐标,进行线性回归,得到方程,当Y=3时计算的X值就是LoD,当Y=10时,X为LoQ。具体例子如下。

LoD & LoQHeightS/N
Spiked 3ppb-165.56
Spiked 3ppb-254.63
Spiked 6ppb-11614.81
Spiked 6ppb-21513.89
Spiked 8ppb-12018.52
Spiked 8ppb-22220.37
Cal Value(ppb)
LoD2.22
LoQ4.64


此做法,噪声的取值时间段有很大的人为干扰因素,所以噪声值人为影响比较厉害。

2. 第二种方法是通过连续测试空白基质或者含量很低的基质(测试次数大于等于6次),计算SD得到,公式为LoD=Mean(Blank)+3 SD, LoQ=Mean (Blank)+10SD。

此做法不仅仅只适用于色谱分析,并且可以应用到任何给定量分析结果的实验,比如ICP-OES,灰分,凯氏定氮和脂肪等测试。


 
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