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主题：【讨论】多肽药物的液相分析，流动相一般都是什么啊？

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xiaowang268

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发表于：2013/03/23 20:14:38 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

多肽药物的液相分析，流动相一般都是什么啊？检测波长呢？

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2013/3/23 20:15:52 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

都是盐溶液吗？

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青林

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2013/3/24 17:48:01 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

多半是氨基酸类分析，流动相和波长有确定的吗？

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青林

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2013/3/24 17:52:36 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

高效液相色谱法分析组合化学合成结构相似小分子多肽：http://www.sepu.net/html/article/31/31952.shtml

流动相：乙腈-水（20∶80），内含0.1%三氟乙酸为流动相酸性调节剂。检测波长：214nm。

难道是一个色谱条件？不是很清楚!

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xiaowang268

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2013/3/24 18:49:10 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 青林(wyqql2060) 发表:
高效液相色谱法分析组合化学合成结构相似小分子多肽：http://www.sepu.net/html/article/31/31952.shtml

流动相：乙腈-水（20∶80），内含0.1%三氟乙酸为流动相酸性调节剂。检测波长：214nm。

难道是一个色谱条件？不是很清楚!

检测波长一般都很低的

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2013/3/24 18:49:56 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

加三氟乙酸的目的是？调PH?

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tianru的爸爸

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2013/3/25 9:15:52 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
都是盐溶液吗？

不一定，在用凝胶、离子、亲和色谱分析时以盐溶液为主。

在用反相、正相分析时以有机溶剂为主。

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2013/3/25 9:26:19 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
加三氟乙酸的目的是？调PH?

三氟乙酸是作为离子对试剂存在的，常用于乙腈的流动相中（反相色谱），目的是增加色谱峰的对称性，作用基础：乙腈中的三氟乙酸通过与疏水键合相及残留的极性表面以多种模式相互作用，从而改善峰形、克服峰的展宽以及拖尾的问题，同时氟乙酸与蛋白及多肽表面上的正电荷以及极性基团相结合以减少极性保留，把蛋白或多肽带回到疏水的反相表面，另外三氟乙酸又以同样的方式，屏蔽了固定相上残留的极性表面。

该帖子作者被版主 hyheying加 2积分， 2经验，加分理由：积极讨论

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2013/3/25 9:29:28 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
检测波长一般都很低的

是的，除了一些特殊蛋白或多肽，如含铜离子、铁离子等，一般用280nm或者210-220nm检测，前者是蛋白质中特定氨基酸的检测波长，后者是多肽或蛋白质中特有的肽键的主吸收峰波长。

该帖子作者被版主 xiaowang268加 2积分， 2经验，加分理由：奖励

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2013/3/26 9:41:29 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
检测波长一般都很低的

是的，除了一些特殊蛋白或多肽，如含铜离子、铁离子等，一般用280nm或者210-220nm检测，前者是蛋白质中特定氨基酸的检测波长，后者是多肽或蛋白质中特有的肽键的主吸收峰波长。

看来你对这方面很熟悉啊，是做这方面研究的吗

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xiaowang268

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2013/3/26 9:43:56 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
加三氟乙酸的目的是？调PH?

三氟乙酸是作为离子对试剂存在的，常用于乙腈的流动相中（反相色谱），目的是增加色谱峰的对称性，作用基础：乙腈中的三氟乙酸通过与疏水键合相及残留的极性表面以多种模式相互作用，从而改善峰形、克服峰的展宽以及拖尾的问题，同时氟乙酸与蛋白及多肽表面上的正电荷以及极性基团相结合以减少极性保留，把蛋白或多肽带回到疏水的反相表面，另外三氟乙酸又以同样的方式，屏蔽了固定相上残留的极性表面。

很专业，学习！

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