连翘酯苷A的测定
摘要:
中药连翘为木犀科植物连翘的干燥果实.具有清热、解毒、消肿、抗菌及抗病毒功效,用于风热感冒、发热头痛、咳嗽口干、咽喉疼痛等症状。
实验及分析部分
范围
银翘解毒片中连翘酯苷a的含量的测定。
原理
本方法采用高效液相色谱法,超声振动提取,自动进样器进样,高性能液相色谱柱分离,紫外检测器检测,保留时间定性,峰面积定量,外标法计算结果。
仪器
高效液相色谱仪:紫外检测器
在线脱气机
自动进样器
柱温箱
电子天平
超声波清洗器
试剂
乙腈:色谱纯
甲醇:色谱纯
水:超纯水
冰醋酸溶液:分析纯
连翘酯苷a对照品(纯度>98.0%)
测试溶液的制备
对照品贮备溶液
精密称取干燥至恒重的连翘酯苷a对照品50.00 mg置50 ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀即得。
样品溶液
取本品5g片,研碎,混匀,精密称定2.5 g,置50 ml具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇水溶液25 ml,密塞,称定重量,超声处理20 min后放冷,称定重量,用70%甲醇水溶液补足减失重量,摇匀,0.45uml微膜过滤后待测。
色谱条件
色谱柱:Venusil ASB C18 色谱柱,4.6×250mm,5μm;
S/N:S9520525CK0215
流动相:乙腈:0.4%冰醋酸溶液=17︰83 (V:V)
流速:1.0 ml/min
检测波长:324 nm
柱温: 室温
进样量:1Oul
色谱图
连翘酯苷对照品溶液色谱图
连翘酯苷供试品溶液色谱图
线性关系测试
分别精密量取0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 ml置 10 ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。按实验条件依法测定,以峰面积与浓度计算回归方程为:y=8.5124×103-6.3257x,r=0.99996。
精密度测试
取某银翘解毒片制备供试品溶液,连续进样6次,根据峰面积计算,得连翘酯苷a的rsd为1.21%。
样品稳定性测试
取某银翘解毒片制备供试品溶液,分别在 0、3、6、9 h进样测试,测定连翘酯苷a的RSD为1.23%。
结论
本方法样品处理简单,测定结果准确可靠,各项验证结果正常,结果表明本法可用于银翘解毒片生产过程的质量控制,商检、质检、药检控制。