主题:病毒做TEM,纯度要求?可不可以包含PEG8000?

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tibhar
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病毒做TEM,纯度要求?可不可以包含PEG8000?

DMEM+血清培养的细胞,产生病毒于培养基上清液,预报离心和过滤后,超离心,用Tris-EDTA-NaCl溶液悬浮。能不能直接负染,看TEM?

有时候,在培养上清中添加PEG8000(聚乙二醇)后,高速离心,Tris-EDTA-NaCl溶液悬浮。那么这样会造成怎样的后果?

我们管TEM的老师说可能会不好,但可以试试。
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汗,这个还是问问hailanshi,juejueld,urumqi还有dzxwj大侠。
athenafan
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kutoku
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我有做过病毒的TEM,不过样品的前处理都是由学生自己完成的,不同的病毒浓度要求也有很大的差别,我看过的噬菌体病毒就要浓缩才好找,而另一种虾病毒却要稀释100000x!晕吧,呵呵。我的经验是病毒样品先吸附30min,负染5min,不知道对你的样品合不合适。
davidphys
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toallen
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一般做植物病毒的话,我们都是提取病毒后,复染,在置于铜网就可以看了.
lsh197635
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leehead
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leehead
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要吸附这么长时间呀,请问有没有做过时间梯度呢?负染时间又是怎么确定的呢?
kutoku
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没有作时间梯度,负染时间也是经验, 呵呵,不过负染跟温度有关,外界温度低的话负染时间要长
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