主题:【讨论】用HILIC柱子做了下氨基糖苷类,发现有其丑无比的峰!

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chy57589893
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sukiliang
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原文由 chy57589893(chy57589893) 发表:

看图明显是色谱柱问题,换个柱子试试吧。


- -!这根柱子是新的哦!还冲了一个晚上的!
continuum
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原文由 sukiliang(sukiliang) 发表:
原文由 continuum(continuum) 发表:
回溶液加1%FA试试看
另外这几个你去看paper 峰都不会太完美


1%FA的ph那是很低的了,柱子的ph承受能力好像没那么低!谢谢你的建议!

回去测测ph看看,不过这柱子比c18的好多了,最起码不会一次性一个峰就出完!


还好啦 FA没强到那样

不过回溶液可能严重影响峰型,,

最近follow一篇paper试了一下

大概了解了。。。

他们主要用 mixed mode column

而且主要靠的并不是hilic而是WCX

所以这类用的条件都很tricky

gradient到90%的水相~~

这在一般HILIC很少见
该帖子作者被版主 nankingee2积分, 2经验,加分理由:感谢分享
continuum
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原文由 chy57589893(chy57589893) 发表:

看图明显是色谱柱问题,换个柱子试试吧。


No

这类化合物很难搞

以往都用C18搭ion pairing buffer

现在接质朴有些人开始改用HILIC的column

只是还是不好搞

有retent但是峰型不保证能看 。。。。。
该帖子作者被版主 sukiliang5积分, 2经验,加分理由:肉流满面!知己啊,氨基糖苷类真的很难做!
sukiliang
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原文由 continuum(continuum) 发表:
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回溶液加1%FA试试看
另外这几个你去看paper 峰都不会太完美


1%FA的ph那是很低的了,柱子的ph承受能力好像没那么低!谢谢你的建议!

回去测测ph看看,不过这柱子比c18的好多了,最起码不会一次性一个峰就出完!


还好啦 FA没强到那样

不过回溶液可能严重影响峰型,,

最近follow一篇paper试了一下

大概了解了。。。

他们主要用 mixed mode column

而且主要靠的并不是hilic而是WCX

所以这类用的条件都很tricky

gradient到90%的水相~~

这在一般HILIC很少见


试过加了5ml的FA,PH大概在2点多。90%的水相对hilic好像不怎么好!不过到现在有几个物质还没完全分开!
jay1
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原文由 sukiliang(sukiliang) 发表:
氨基糖苷类药物我们要做庆大霉素,安普霉素,丁胺卡那霉素,链霉素,新霉素!

丁胺卡那霉素和链霉素的峰都出得不错,而且还分得很开,但是庆大霉素的峰就很奇怪了~~~~

流动相a是10mm乙酸胺+0.1%甲酸,b相是0.1%甲酸乙腈

先来张mrm图



下面是庆大霉素的提取离子图





还有安普霉素的峰也是十分诡异的





- -!请问各位大侠到时是哪里出错的呢?就是有几种药做不出啊,我也很郁闷啊!
sukiliang
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原文由 jay1(jay1) 发表:
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氨基糖苷类药物我们要做庆大霉素,安普霉素,丁胺卡那霉素,链霉素,新霉素!

丁胺卡那霉素和链霉素的峰都出得不错,而且还分得很开,但是庆大霉素的峰就很奇怪了~~~~

流动相a是10mm乙酸胺+0.1%甲酸,b相是0.1%甲酸乙腈

先来张mrm图

下面是庆大霉素的提取离子图

还有安普霉素的峰也是十分诡异的

- -!请问各位大侠到时是哪里出错的呢?就是有几种药做不出啊,我也很郁闷啊!


??
十年磨一剑
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尝试不同的PH的流动相,不同的色谱柱,多尝试下,有时候对梯度也很敏感……
sukiliang
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原文由 十年磨一剑(xubang123) 发表:

尝试不同的PH的流动相,不同的色谱柱,多尝试下,有时候对梯度也很敏感……


如果用c18的柱子做氨基糖苷类会不保留,需要加入七氟丁酸!

除了这柱子还真想不到用哪种了!
continuum
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