主题:【讨论】GPC应用在植物成分制备上

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辣椒炒肉
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各位老师,我们单位有一台莱伯泰科的GPC,又紫外检测器,自动浓缩装置,还有自动进样装置,GPC柱子规格不清楚,原本用作农药残留净化用,定量环2ml,工程师说还可以加到8ml。现在我想利用它做一个植物功能成分的制备,在这个植物初提取物中,这类功能物质分子量在190-250之间。

工程师说他们没有做过这方面的工作,请问各位老师,我该选择什么样的GPC柱子呢,还有什么工作要做?

谢谢!
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richies
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换柱子就成,中药一般用硅胶柱
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richies
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不过LZ说的GPC跟这个GPC板块讨论的主流问题不是一个概念的
小不董
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不过LZ说的GPC跟这个GPC板块讨论的主流问题不是一个概念的


都属于GPC,只是一个是制备,或前处理,一个是分析。

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都属于GPC,只是一个是制备,或前处理,一个是分析。

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不一样的

做分析的GPC,是指体积排阻,凝胶分析色谱

这个GPC,也算是色谱,不过压力,填料性质差了很多

做中药,一般用C18的,50um左右的中压制备系统最多
辣椒炒肉
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都属于GPC,只是一个是制备,或前处理,一个是分析。

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做分析的GPC,是指体积排阻,凝胶分析色谱

这个GPC,也算是色谱,不过压力,填料性质差了很多

做中药,一般用C18的,50um左右的中压制备系统最多


大侠,这个道理我明白,我这个应该叫做凝胶净化系统,填料也是凝胶,净化原理也是体积排阻,C18的原理是极性。

GPC我不太懂,液相还行,比如一般液相柱要做一些物质的分离,我们更多是从极性上考虑。如我所问,我要的这类化合物分子量在190-250之间,如何选择GPC柱子?

图上就是我现在这套凝胶净化设备用的柱子,请大虾们给点指导。谢谢
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2013/7/4 23:08:00 Last edit by yzwujing
richies
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都属于GPC,只是一个是制备,或前处理,一个是分析。

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做分析的GPC,是指体积排阻,凝胶分析色谱

这个GPC,也算是色谱,不过压力,填料性质差了很多

做中药,一般用C18的,50um左右的中压制备系统最多


大侠,这个道理我明白,我这个应该叫做凝胶净化系统,填料也是凝胶,净化原理也是体积排阻,C18的原理是极性。

GPC我不太懂,液相还行,比如一般液相柱要做一些物质的分离,我们更多是从极性上考虑。如我所问,我要的这类化合物分子量在190-250之间,如何选择GPC柱子?

图上就是我现在这套凝胶净化设备用的柱子,请大虾们给点指导。谢谢


凝胶都是按照分子量来排阻的

如果你做中药小分子,不能用这个原理的色谱柱,分子量太小,不保留,还是要用吸附或者分配的原理
小不董
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大侠,这个道理我明白,我这个应该叫做凝胶净化系统,填料也是凝胶,净化原理也是体积排阻,C18的原理是极性。

GPC我不太懂,液相还行,比如一般液相柱要做一些物质的分离,我们更多是从极性上考虑。如我所问,我要的这类化合物分子量在190-250之间,如何选择GPC柱子?

图上就是我现在这套凝胶净化设备用的柱子,请大虾们给点指导。谢谢


供参考:

采用SX-3生物珠作为填料(200-400目),分离油脂等大分子物质首先 流出,随后是小分子物质。这种方法特别适合于净化含有较高脂肪的样品。

可用于分离分子量小的有机多聚物和其它疏水物质,如杀虫剂、灭鼠 剂、多环芳香化合物和不饱和脂类。

(即envirobeads sx-3 ) 200-400 mesh相当于40-80um;100克/瓶1522750

溶胀体积4.75ml/g分离有机混合物,最高mw2000

凝胶渗透色谱 GPC  填料: Bio-Beads  SX3  GPC 柱型 30cm×25mmID(柱子下面有砂芯)  填料 30g于烧杯中    加入DCM:Hexane(1:1,V:V)全部盖住    铝箔纸盖住烧杯置于通风橱过夜,至少12hrs,填料充分溶胀    搅动填料,并用吸管逐步将填料转移到柱中,中间打开四氟阀放去多余的溶剂    全部转移后,上部留有10cm溶剂    上端加塞,底部关阀    整个柱子倒置后打开阀门    振荡柱体,使填料逐渐整体均匀倒置    关闭阀门,将柱子缓慢扶正,并且打开上面的磨口塞,可以看到填料均匀沉降直 至完全    应该无断层,无气泡,无沉降分界层    500mL DCM:Hexane(1:1 ,V:V)淋洗,(注意要将溶剂混合均匀)  滴速 2-3滴/S    不用时关阀加塞密闭,上层留有5CM以上的溶剂,GPC使用溶剂均为DCM:Hexane(1:1,V:V)若长时间没用,纯化前用100mL溶剂预淋洗  GPC洗脱    DCM:Hexane(1:1,V:V)    100mL 预淋洗(量筒接)量筒1    上样后,先用50 mL DCM:Hexane(1:1,V:V)去掉大分子(量筒接)量筒2    另外量筒接70mL(DCM/Hexane=1/1)为PCB 量筒3    另外量筒接50mL,量筒4    量筒4与量筒2  50mL合并保存,以防重复实验时回收再分析    12    注意:  1若GPC柱中物料层有气泡,则上面用塞子堵上,稍微晃一下柱子可以去除。若溶剂干了会造成断层。  2GPC柱用前由于重心作用,上层发胀,所以需要释放一段洗脱溶剂,将发胀部分压下去,再上样。
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