主题:【第六届原创】柱层析装层析柱——悲剧!

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butterfly琳
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从来没做过柱层析的实验,这次有机会自己亲手做一次柱层析,哎呀,这个填装层析柱真是令我感触颇深啊。大家就听我慢慢道来我这填装层析柱的纠结过程吧……

这个装柱啊,那可有了学问了,那不是一般人能装的好的。就为这,我咨询了好几个有过装层析柱经验的同事,然后开始了我那悲催的装柱历程……

第一根柱子,先给大家见个图




先跟大家说个事儿:我买的这种柱管,是带500ml储液球的,这是国标上要求的。它带着储液球的原因就是为了能够将洗脱液全部放入,不用分次放入,但是……其实根本用不到这样的,35g硅胶装出来的柱床其实很矮,口呢离着柱床很高,放入洗脱液的时候如果不小心,海砂和硅胶就会被冲起来,这根柱子就算是废掉了,所以大家在选择层析柱管的时候千万根据条件好好挑选,不然的话,后果真的是不堪设想……

下面开始装柱啦:把硅胶称到烧杯里称好了,然后倒入洗脱液,咳咳咳咳……呛死了,往里面一倒那洗脱液啊,就会有少许硅胶飞出来啊,烧杯里的硅胶冒着泡,用玻璃棒搅拌,并不时的敲敲烧杯,把气泡弄碎,把硅胶搅拌的均匀了,然后倒进柱管里。哎呀,纠结的我呀!就怕硅胶不均匀,搅了又搅啊,终于是把硅胶倒进去了,沾得壁上哪都是,然后快速的用洗脱液去洗,气泡倒是不怎么有,但是硅胶装的平不平也是影响分离度的关键啊,结果我装的就是不平,人家都说用玻璃棒敲敲就平了,可是我左敲右敲就是没办法弄平,算了,今天只当练习了,就这么滴吧~然后就开始放洗脱液至硅胶面10cm左右,我放着放着突然想起来海砂还没称呐!!就赶紧去称海砂4g,您别说,这海砂还真沉……等洗脱液放的差不多了,拧上活塞,倒入海砂,结果发现……这也太不平啦啊~都跑偏到哪去了啊……玻璃棒还是左敲右敲,没反应,唉,就这么滴吧~放洗脱液至与海砂面平齐,装的第一根试验柱算是悲悲催催完成……

下面是见图时间:




大家看见了吗?硅胶都歪到姥姥家去了~



来个近点的~



大家看见那个坑了吗?没装好造成的~

最后给大家来个厉害的,就是我上面提到过的硅胶被洗脱液冲起来的现象。大家往下看



就是这样哒~悲剧不?所以选好柱管也是柱层析的一个关键啊~

好在我做了个预实验,不过这次很失败,下次继续……
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dahua1981
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可以先用移液管加到一定程度后在大量加就不会冲起来了
butterfly琳
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原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:

可以先用移液管加到一定程度后在大量加就不会冲起来了


嗯哪,后来我吸取了教训,就先用移液管加了几十毫升,然后再将剩余的倒进去,就不会冲起来了~
zhw19811005
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这是一个失败的经验吧


对,给大家一个失败的经验,以后注意!
dahua1981
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这是一个失败的经验吧
本来很多经验就是建立在失败之上的
happy水中月
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硅胶加洗脱液的时候放到通风厨里面进行。

柱管根据自己硅胶的多少选择长短不同的,否则就会像楼主那样的很悲催

还有那个球形的可以做成下面和柱子配套的标准磨口的,装洗脱液之前,在海砂上面放脱脂棉,可以防止硅胶和海砂被洗脱液冲起来。
该帖子作者被版主 emoc983114积分, 2经验,加分理由:好建议
butterfly琳
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原文由 happy水中月(lianlxh) 发表:
硅胶加洗脱液的时候放到通风厨里面进行。

柱管根据自己硅胶的多少选择长短不同的,否则就会像楼主那样的很悲催

还有那个球形的可以做成下面和柱子配套的标准磨口的,装洗脱液之前,在海砂上面放脱脂棉,可以防止硅胶和海砂被洗脱液冲起来。


嗯,当时不了解还有分离式的,我们的采购就给买了这种的,所以很悲催~
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原文由 尘(fjh26) 发表:

装硅胶前不先加点玻璃棉吗?


我买的这个是下面是带着砂芯的,所以不用玻璃棉~
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