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主题：【求助】出峰面积不重复

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nini2006
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2013/8/28 21:11:27 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

不知你用什么模式分离。一般情况下DNA吸附严重，如果有吸附现象，重现性肯定不好。


是的，我刚开始两针之间只用缓冲液冲洗，两针之间峰面积差距非常大，后来加上NaOH冲、水冲就好了很多。看来这东西不能省。

现在的问题是我加上了这些以后峰面积重复性仍然是不理想的，两针之间的峰高能差到10 RFU。
每一针跑多久？如果跑的时间比较长，每跑完一针灸换一次缓冲液。
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wy20071722
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2013/8/29 9:03:43 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

不知你用什么模式分离。一般情况下DNA吸附严重，如果有吸附现象，重现性肯定不好。


是的，我刚开始两针之间只用缓冲液冲洗，两针之间峰面积差距非常大，后来加上NaOH冲、水冲就好了很多。看来这东西不能省。

现在的问题是我加上了这些以后峰面积重复性仍然是不理想的，两针之间的峰高能差到10 RFU。
每一针跑多久？如果跑的时间比较长，每跑完一针灸换一次缓冲液。


5分钟就出峰了。
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ericwong
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2013/8/29 13:45:48 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
现在如果换成紫外检测，是否能够重复呢？
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wy20071722
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2013/8/29 14:04:31 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ericwong(ericwong) 发表:

现在如果换成紫外检测，是否能够重复呢？


换成紫外的是能够重复的。这样就排除了进样的不同造成的影响，对吧？
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ericwong
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2013/8/30 9:01:08 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 ericwong(ericwong) 发表:

现在如果换成紫外检测，是否能够重复呢？


换成紫外的是能够重复的。这样就排除了进样的不同造成的影响，对吧？

感觉应该是这样
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wy20071722
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2013/9/4 9:41:41 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢大家帮助。现在换成涂层管峰面积重复了。看来还是吸附的问题。
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wy20071722
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2013/9/4 9:52:12 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为什么在紫外就没有发现吸附呢？
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手机版： 出峰面积不重复
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