主题：【讨论】怎么确定样品浓度呢

原文由 tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:
举个例子：
我们常做的蛋白溶液，通常浓度在1-2mg/ml，有关物资一般要求不超过3%，或者1%、0.5%几个档。
如果是3%，可以用SE-HPLC方法分析，如果1%或者0.5%就可以用RP-HPLC等有浓缩效果的方法分析。

如果产物是干粉，可以选择蛋白的浓度：一般就尽可能增加有关物资的量，就是最大量进行溶解干粉，同时要确保在分析时主要物质不干扰有关物质的检测，所以一般有所规定一个具体的浓度。这个浓度是根据分析方法的灵敏度来定的。

原文由 生活就这么美好(xiaowang268) 发表:

还有这个进样量是怎么决定的呢？应该和浓度有关系吧

原文由 生活就这么美好(xiaowang268) 发表:

那化药呢，没这么大浓度吧

原文由 tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:

原文由 生活就这么美好(xiaowang268) 发表:

那化药呢，没这么大浓度吧

如果你的化药在该方法中，灵敏度不够高，而又要求测定出一定量的杂质，如0.5%，而浓溶液又得不到，则有可能你要换方法，或者改良现有的方法。

原文由 tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:

原文由 生活就这么美好(xiaowang268) 发表:

还有这个进样量是怎么决定的呢？应该和浓度有关系吧

进样量是根据分析方法来确定的。

如果做含量分析：根据线性方程的上下限确定。

如果是杂质的限量方法：根据限量的值来定，如，

SE-HPLC分析蛋白溶液，正常上样量要求不少于20微克或者不少于20微升（最大不超过100微升），目的是控制上样体积在20-100微升之间，蛋白量在20-100微克之间。而一般要求杂质在1%之下，则理论上要600纳克蛋白（杂蛋白，也可以是有关物质），而这个200纳克，就是因为一般SE-HPLC的定量下限就在100纳克，所以有200纳克就可以定量，同样也可以用在限量上。实际上是根据分析方法来倒推计算的。

——因为分析方法确定了最低检测100纳克（杂质），而按照要求杂质超过1%要报告，所以总上样量不少于10微克，至于浓度，是因为分析方法一般上样量不超过100微升，所以要控制一定的浓度，一般控制在1mg/ml附近：最后确定上样量为不少于20微克，上样体积不少于20微升。（如果浓度过高就稀释后再分析。）

如果换成化药，同样的道理：如果做杂质分析，先确定杂质比例（就是要报告、计算的比例），再确定方法的最低定量限（最好就是该杂质的），或者检测限，根据这些计算上样量的最低值，再确认分析方法的处理体积（色谱分析就是每次的上样量），确定最低浓度，最好确定一个好操作、好记忆的量。

原文由 zzz23010402(zzz23010402) 发表:

一般根据仪器的灵敏度定吧~化药10或100吧