紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】分光光度计法测溶液中某种物质含量,空白的选择问题

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晨曦de清风
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本帖所述都是样液+显色剂的显色反应

有的实验方法,是用蒸馏水+显色剂做空白,样液+显色剂比色(例如,啤酒中β葡聚糖含量,刚果红法);而有的是用样液+蒸馏水做空白,样液+显色剂比色(例如,啤酒中铁含量,邻菲罗啉法)

请问,这个空白的选择有什么规则吗?为什么还不一样?
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tutm
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依我看,基本的选择原则应该是:其中参比液所含的物质数量能消除背景干扰,最大程度上提高检测方法的灵敏度,所测波长的吸光度尽可能只随被测物浓度而变。

没做过你写的两种分析,也不清楚具体做法。
但猜想第一种测试中,显色剂在测试波长下有一定吸光度,而样液本身在此波长下没有明显吸收,吸光度只随显色剂数量或它的转化率变化。
第二个,检测波长下样液有吸收,但是稳定的,吸光度只随显色剂数量或它的转化率变化。
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qq493948013
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清清66
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原文由 晨曦de清风(v2819607) 发表:
本帖所述都是样液+显色剂的显色反应

有的实验方法,是用蒸馏水+显色剂做空白,样液+显色剂比色(例如,啤酒中β葡聚糖含量,刚果红法);而有的是用样液+蒸馏水做空白,样液+显色剂比色(例如,啤酒中铁含量,邻菲罗啉法)

请问,这个空白的选择有什么规则吗?为什么还不一样?


这个问题应该归结于选择什么样条件作空白参比了,根据我的理解,得出以下三条,希望可以帮到你,请楼主自行去比较:

(1)样品溶液中不含其他有色干扰离子(样品对在测波长无吸收),不管显色剂有无颜色,可选用不加样品的空白,显色剂照加的空白做参比。也就是你的第一种情况

(2)样品中含有其他有色干扰离子(样品对在测波长有吸收),显色剂本身有颜色,可选用不加显色剂的样品溶液做空白参比。也就是你的第二种情况。

(3)样品中含有其他有色干扰离子(样品对在测波长有吸收),显色剂本身有颜色,可以在一份样品中加入适当掩蔽剂,将被测组分掩蔽起来,然后加入显色剂做空白参比,比色的就不加掩蔽剂。
qq493948013
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Ins_7a10f361
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原文由清清66(v2808180)发表:
原文由 晨曦de清风(v2819607) 发表:
本帖所述都是样液+显色剂的显色反应

有的实验方法,是用蒸馏水+显色剂做空白,样液+显色剂比色(例如,啤酒中β葡聚糖含量,刚果红法);而有的是用样液+蒸馏水做空白,样液+显色剂比色(例如,啤酒中铁含量,邻菲罗啉法)

请问,这个空白的选择有什么规则吗?为什么还不一样?


这个问题应该归结于选择什么样条件作空白参比了,根据我的理解,得出以下三条,希望可以帮到你,请楼主自行去比较:

(1)样品溶液中不含其他有色干扰离子(样品对在测波长无吸收),不管显色剂有无颜色,可选用不加样品的空白,显色剂照加的空白做参比。也就是你的第一种情况

(2)样品中含有其他有色干扰离子(样品对在测波长有吸收),显色剂本身有颜色,可选用不加显色剂的样品溶液做空白参比。也就是你的第二种情况。

(3)样品中含有其他有色干扰离子(样品对在测波长有吸收),显色剂本身有颜色,可以在一份样品中加入适当掩蔽剂,将被测组分掩蔽起来,然后加入显色剂做空白参比,比色的就不加掩蔽剂。
你好,我是属于第一种情况,是直接用显色剂做空白对照就行吗
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