前段时间遇到一个客户,做脂肪酸方面的实验,用到
液质,可是ESI离子喷嘴处出现了大量的盐析,像一层白霜,完全不是正常情况下多次进样后出现的少量盐析,很明显体系中有不挥发性盐,客户一项一项的排查,已经确认不是样品未处理干净的原因,也不可能是用的水的原因,下面是一些条件:
A1相(异丙醇:正己烷:水=30:70:2),B1相(甲醇:水=100:2),两相都含0.5mmol/L的甲酸铵,先A1相23min,然后B1相16分钟进行梯度洗脱,温度控制在25摄氏度,用的是安捷伦的柱子(2.1*150mm,5μm ,Rx-SIL silica column),目标物是脂肪酸类,甲酸铵是sigma HPLC级的试剂。
客户最初怀疑是不是试剂里面有不挥发性的盐,实验用的是 HPLC级试剂,就算是越级使用也不可能会出现如此多的盐析,参考文献中注明的是使用的GC级别的试剂,后面给客户换用了GC级别的试剂(甲醇,异丙醇,正己烷),昨天走了空白样(A1相和B1相,未加甲酸铵)2针,喷嘴处很干净,没有不挥发性盐析出,今天还是走空白样(加入甲酸铵),走了5针,发现喷嘴处有明显的盐析出,咨询了技术人员,怀疑是不是甲酸铵未充分溶解,或者是在色谱柱中有晶体析出的原因,从客户处得知,最早柱压只有四五十,现在都有近二百五了,也询了客户的溶解过程,用水溶解的,溶解之后又经过0.22um的滤膜过滤,再加入A1相和B1相,这个可不可能是甲酸铵先溶之后,又重新析出的原故,客户现在还在排除原因,因为马上面临毕业,也比较急,有没有什么办法可以解决这个问题,请各位老师帮我分析分析原因,不胜感激