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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：求助，两台分光光度计吸光度差别很大

浏览0 回复13 电梯直达
hjfandcyn
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发表于：2006/08/23 13:58:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
两台分光光度计，一台为7230G，一台是尤尼科的UV2100，同一个样品，7230测得的吸光度为0.481，而UV2100为0.516，哪位大虾知道什么原因吗？
谢谢指教！
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2006/8/23 16:07:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很想回答你，可我不懂
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hjfandcyn
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2006/8/23 16:22:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
还是谢谢你的热心回复，郁闷一天了，还是没想明白
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夕阳
anping
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2006/8/24 7:13:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hjfandcyn 发表:
两台分光光度计，一台为7230G，一台是尤尼科的UV2100，同一个样品，7230测得的吸光度为0.481，而UV2100为0.516，哪位大虾知道什么原因吗？
谢谢指教！

由于不知上述两种仪器的光路和电路的结构，只能主观发表几点不成熟的看法，供您参考：
（1）首先最好使用国家计量部门出售的中性玻璃来判断到底是哪台仪器的吸光
    度不准；按照国家规定只有分光光度计是需要强制检验的，无论何种型号
    的仪器，理论上同一个样品的吸光度应该是一致的；
（2）如果仪器是双光束并且检测器是两个（目前一般简易型仪器使用的是硅光
    二极管）的话有可能两个通道的放大倍数不一致，这是客观存在；但一般
    仪器都可用暗电流调零功能来校正；
（3）双光束仪器的测量结果是有扣除背景的功能，您测量时参比侧放置同种溶
    液了吗？如果是单光束仪器和双光束仪器相比，就没有可比性了；还有样
    品杯同一性的因素也很重要，从您的测量结果来看仅差0.03Abs，参比道的
    因素较大；
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hjfandcyn
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2006/8/24 8:46:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
多谢楼上的答复，两台仪器都是单光束的，我怀疑是因为两台仪器的带宽不一样，导致了结果的差别，不知道有没有道理呢？
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tianru的爸爸
lxdongzi2003
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2006/8/24 9:14:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hjfandcyn 发表:
两台分光光度计，一台为7230G，一台是尤尼科的UV2100，同一个样品，7230测得的吸光度为0.481，而UV2100为0.516，哪位大虾知道什么原因吗？
谢谢指教！

两台仪器不能吻合，是很正常的，你这个相差也不算太大（0.035）。
首先一个是波长的准确性，如果都能做全波长扫描，在你测试的波长附近（有个+/-50nm，就够了）扫描一下，看看有无区别。
另外，你所用的比色皿是否为同一个，所用的空白调零是否为同一个，这个也是要考虑的。
还有一个就是环境的影响，如果两台仪器在同一个室内，温度和湿度等条件一致就不会有太多的干扰。如果有一台在空调送风口吹着风，那就会有区别了。
至于狭缝的大小是有所影响的，但不应该大。因为吸光度是一个比值。倒是狭缝过大，会严重影响光谱的纯度，以及两者的狭缝大小不一，从而影响吸光度。
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hjfandcyn
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2006/8/24 9:38:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
两台仪器都没有波长扫描功能，但我用镨铷滤光片调较过波长，波长精度方面应该没问题，测试时用的是仪器购买时配的0.5A的滤光片，没用比色皿，不存在样品自身的反应分解的问题，和两个比色皿之间的配对问题，两台仪器的确不在同一个实验室，但是在0.5A附近相差0.035，误差达7%，这是不能忍受的，如果只差0.01我就不用上网求助了。
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zjy365286
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2006/8/24 10:08:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议你做一下吸光度准确度检查,方法如下:

吸光度准确度:
精密称取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，置1000ml量瓶中，用硫酸液(0.005mol/L)溶解并稀释至1000ml，用配对的lcm石英池，以硫酸液(0.005mol/L)为空白，在235，257，313，350nm分别测定吸收度，然后换算成E1%1cm，测得值应符合下表中规定的允差范围(±1%)。国际药典规定的允差亦为±1%。
分光光度法允差范围
波长(nm)    吸收强度    吸收系数(E1%1cm)允差范围

235     最小     124.5         123.3～125.7
257     最大     144.0         142.6～145.4
313     最小     48.62         48.13～49.11
350     最大     106.6         105.5～107.7
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xhcheng131
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2006/8/24 10:18:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有绝对相同的东西。
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tianru的爸爸
lxdongzi2003
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2006/8/24 11:12:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hjfandcyn 发表:
两台仪器都没有波长扫描功能，但我用镨铷滤光片调较过波长，波长精度方面应该没问题，测试时用的是仪器购买时配的0.5A的滤光片，没用比色皿，不存在样品自身的反应分解的问题，和两个比色皿之间的配对问题，两台仪器的确不在同一个实验室，但是在0.5A附近相差0.035，误差达7%，这是不能忍受的，如果只差0.01我就不用上网求助了。

0.5A的滤光片，应该是一个标准值，现在两个机器都不到这个值，那你的机器的吸收值的准确性有问题了。可以再进行一次准确度检查，如果不合格，就该修理了。
建议找厂家来处理，估计是要换灯了。
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catter
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2006/8/24 17:40:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在这几方面进行考虑：
1、是否使用了同样厚度的比色皿；
2、是否都有同样的滤光片；
3、波长是否准确；
4、是否做了重复多次的试验；
5、电压或电流、光源是否稳定。
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