紫外可见分光光度计(UV)

主题:酶学参考测量试剂空白高,测量值上不去

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        大家好

      在最近实验中  遇到了一些问题  和相关专业老师请教    方法为IFCC参考方法    为分光光度法

      1  试剂空白明显增高

      2  标准物质的值做不上去  总是偏低

      3  但是  所有检查都能通过  如钬玻璃  中性滤光片  紫外溶液

      很奇怪的是  所有这些检查既然都能过  试剂和样本也确定了没问题  为什么用连续检测法就是值变低了呢 

分光光度计用的Cary100  这种情况  设备最可能出现问题的地方是哪里   

希望和大家交流学习 

                                                                                             
推荐答案:tutm回复于2014/07/02


您好。谢谢您的关注。是做的扫描动力学测试。扫描过钬玻璃,中性滤光片,还有中国计量院的紫外溶液,都没问题。波长也没有问题。

怀疑仪器的原因是我们拿同样的标准物质作为样本,同样的试剂,去别的单位用相同的仪器cary100,值没问题啊。可检查都过得话,工程师不承认是仪器的问题。这情况很奇怪,现在我们一怀疑Block的问题,二怀疑光电倍增管的问题。您看其他有哪些可能呢?

哦,是这样,看来仪器的主要性能应该没有明显问题。

我不清楚你说的BLOCK问题是指什么,但我想你们到别的单位做是正常的,不同之处还有使用的比色皿和带宽设置,建议你看下比色皿会否用错,带宽设置值是否太小了。
补充答案:

Spain回复于2014/09/01

配置稳压电源。
注意杯子里面的温度,温度探头插入的深度和点温计的深度一样,最好浅点(点温计比较细,带走的热量比较少,温度探头相反,所以看起来温度会波动大些);
温度探头的盖子看一下德国人是怎么做的,好像他们是用的比色皿的盖子打了个孔把温度探头插到里面,盖子可能会影响温度。

spone回复于2014/09/04

标准检测都过的话,说明仪器本身基本正常。测试数据不对,考虑到是酶动力学反应,不知道你的吸光度值在什么范围,如果吸光度较高,可能是你这台仪器的线性范围较小(杂散光较高)。另外可能有问题的是双光束光路里的参比光路,如果参比扣除出问题的话,也会有你这样的问题产生。

ll001回复于2014/10/28

标准检测都过的话,说明仪器本身基本正常。测试数据不对,考虑到是酶动力学反应,不知道你的吸光度值在什么范围,如果吸光度较高,可能是你这台仪器的线性范围较小(杂散光较高)。另外可能有问题的是双光束光路里的参比光路,如果参比扣除出问题的话,也会有你这样的问题产生。

该帖子作者被版主 烟雨江南2积分, 2经验,加分理由:悬赏补分
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连续检测法做的是时间扫描的动力学测试?
扫描过吸收光谱吗?检测的波长是否合适?
为什么怀疑是仪器问题?测其他样品是否正常?
时间扫描起始是否正常?

信息太少无法猜测的
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检测什么项目?具体操作方法如何?都没有说明白很难分析判断出是什么问题
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连续检测法做的是时间扫描的动力学测试?
扫描过吸收光谱吗?检测的波长是否合适?
为什么怀疑是仪器问题?测其他样品是否正常?
时间扫描起始是否正常?

信息太少无法猜测的



您好。谢谢您的关注。是做的扫描动力学测试。扫描过钬玻璃,中性滤光片,还有中国计量院的紫外溶液,都没问题。波长也没有问题。

怀疑仪器的原因是我们拿同样的标准物质作为样本,同样的试剂,去别的单位用相同的仪器cary100,值没问题啊。可检查都过得话,工程师不承认是仪器的问题。这情况很奇怪,现在我们一怀疑Block的问题,二怀疑光电倍增管的问题。您看其他有哪些可能呢?
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检测什么项目?具体操作方法如何?都没有说明白很难分析判断出是什么问题


检测的时酶学项目,这次做的是IFCC方法AMY项目。用的是连续监测法。先加R1和样本,孵育,再加R2。操作绝对没问题。我们实验室技术很纯熟,体系也非常完善。已经有近十年的经验了。可现在遇到的上述问题真是第一次见。
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检测什么项目?具体操作方法如何?都没有说明白很难分析判断出是什么问题


检测的时酶学项目,这次做的是IFCC方法AMY项目。用的是连续监测法。先加R1和样本,孵育,再加R2。操作绝对没问题。我们实验室技术很纯熟,体系也非常完善。已经有近十年的经验了。可现在遇到的上述问题真是第一次见。
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原文由 tutm(tutm) 发表:
连续检测法做的是时间扫描的动力学测试?
扫描过吸收光谱吗?检测的波长是否合适?
为什么怀疑是仪器问题?测其他样品是否正常?
时间扫描起始是否正常?

信息太少无法猜测的



您好。谢谢您的关注。是做的扫描动力学测试。扫描过钬玻璃,中性滤光片,还有中国计量院的紫外溶液,都没问题。波长也没有问题。

怀疑仪器的原因是我们拿同样的标准物质作为样本,同样的试剂,去别的单位用相同的仪器cary100,值没问题啊。可检查都过得话,工程师不承认是仪器的问题。这情况很奇怪,现在我们一怀疑Block的问题,二怀疑光电倍增管的问题。您看其他有哪些可能呢?


哦,是这样,看来仪器的主要性能应该没有明显问题。

我不清楚你说的BLOCK问题是指什么,但我想你们到别的单位做是正常的,不同之处还有使用的比色皿和带宽设置,建议你看下比色皿会否用错,带宽设置值是否太小了。
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这款设备时候购买的,你测的样品名称及浓度是多少?
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配置稳压电源。
注意杯子里面的温度,温度探头插入的深度和点温计的深度一样,最好浅点(点温计比较细,带走的热量比较少,温度探头相反,所以看起来温度会波动大些);
温度探头的盖子看一下德国人是怎么做的,好像他们是用的比色皿的盖子打了个孔把温度探头插到里面,盖子可能会影响温度。
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标准检测都过的话,说明仪器本身基本正常。测试数据不对,考虑到是酶动力学反应,不知道你的吸光度值在什么范围,如果吸光度较高,可能是你这台仪器的线性范围较小(杂散光较高)。另外可能有问题的是双光束光路里的参比光路,如果参比扣除出问题的话,也会有你这样的问题产生。
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标准检测都过的话,说明仪器本身基本正常。测试数据不对,考虑到是酶动力学反应,不知道你的吸光度值在什么范围,如果吸光度较高,可能是你这台仪器的线性范围较小(杂散光较高)。另外可能有问题的是双光束光路里的参比光路,如果参比扣除出问题的话,也会有你这样的问题产生。
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