主题:【讨论】关于毛细管电泳的检测手段

浏览0 回复11 电梯直达
wolf007_1
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大家可以把自己做毛细管电泳用的都是什么检测手段说一下,看看我们国内目前都有哪些手段,大家可以说说自己的检测方法的优缺点,相互学习,共同进步。
我们目前主要用化学发光和电致化学发光手段来检测,我们做的是普通的毛细管区带电泳,用的是柱端液池式的检测方法,不需要场分离器,而且我们的方法不需要光源,没有背景光信号的干扰,有较高的检测灵敏度,也不需要做衍生。
但是我们这个方法还是有一定的问题,就是化学发光手段的发光试剂很有限,能检测的物质很少,而且如果用最长用的鲁米诺体系,发光试剂本身还存在消耗,必须做成流通式的,比较麻烦。
而电致化学发光虽然试剂可以循环使用,试剂消耗很少,但是需要一套电化学电极系统,电化学的电场和电泳电场有一定的重叠,也有一定的问题,会导致重现性不好。
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芝兰
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我用的安捷伦毛细管电泳仪配的是DAD紫外检测器,虽然方便,但灵敏度低是它的硬伤。
有时候根本检测不到紫外吸收较低的样品。如200 μM的阿司匹林常规进样量根本检测不到。
曾经用过安捷伦的高灵敏度检测池,感觉不错,灵敏度能提高十倍左右。附图如下:

它也是基于扩大光程来提高灵敏度的。
芝兰
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毛细管电泳中不同检测器的检测限(LOD)如下:

*图中“Direct on-column LIF”的检测限的指数应为-13。
以上所列的检测方法并不全,还没有包括MS等。
wolf007_1
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很好,有图,很明白,但是他这样将毛细管折弯,会不会在两个角的位置留下死体积,从而引起基线升高呢?那LIF是不是也可以采用这种方式呢?
芝兰
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据说不会有什么异常。
有死体积基线就会升高吗?不是很明白,望赐教。
他这样做是因为紫外吸收的强度和光程成正比,难道LIF的强度也和光程成正比吗?
芝兰
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芝兰
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芝兰
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wolf007_1
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非常感谢啊,学到了很多,多谢楼上的!
以后还有很多问题,还请多多指教!
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