主题:【求助】牛磺酸谱图

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国标所用的柱子略细且长,一般而言窄柱有利于形成窄而高的色谱峰,长柱的出峰时间长,大颗粒填料的柱效低涡流扩散更为明显更容易将色谱峰的对称性拉平,你所用的色谱柱虽然柱效可能和长柱相当但其他性能是不能保证提高的。色谱峰前沿可能的原因一般是过载和溶剂效应,你试试降低进样体积,更换样品溶剂和增加流动相缓冲盐的浓度看看能不能改善.
weiwei0423
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衍生试剂不出峰?你图里没有啊


就这一个峰,如果把标液换成是水,这个峰就没有了,那这个峰应该就是牛磺酸和OPA衍生试剂反应后的产物吧?
用OPA反应没有衍生试剂的峰,这个峰应该就是反应产物的色谱峰,如果不确定,可以做个标曲,看这个峰的响应是否能成线性。把浓度降低试试柱效能不能好一点


因为是2.5ul标液加2.5ul衍生试剂,然后进样量是5ul,进样量只有几十ng,差不多是GB里最低的浓度了。而且怎么都不明白,试验条件完全是GB的,进的是标液,标准上的那个峰是怎么做出来的?
谱图显示的关系吧,标准里的响应值高,出峰时间晚,将谱图纵坐标往小了拉可能就能显得峰窄了


那你是觉得我的那张谱图峰出的还可以?
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衍生试剂不出峰?你图里没有啊


就这一个峰,如果把标液换成是水,这个峰就没有了,那这个峰应该就是牛磺酸和OPA衍生试剂反应后的产物吧?
用OPA反应没有衍生试剂的峰,这个峰应该就是反应产物的色谱峰,如果不确定,可以做个标曲,看这个峰的响应是否能成线性。把浓度降低试试柱效能不能好一点


因为是2.5ul标液加2.5ul衍生试剂,然后进样量是5ul,进样量只有几十ng,差不多是GB里最低的浓度了。而且怎么都不明白,试验条件完全是GB的,进的是标液,标准上的那个峰是怎么做出来的?
谱图显示的关系吧,标准里的响应值高,出峰时间晚,将谱图纵坐标往小了拉可能就能显得峰窄了


那你是觉得我的那张谱图峰出的还可以?
您可以看一下色谱峰的拖尾因子和柱效,如果符合要求,就可以了。《药典》好像规定拖尾因子T为0.95~1.05
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衍生试剂不出峰?你图里没有啊


就这一个峰,如果把标液换成是水,这个峰就没有了,那这个峰应该就是牛磺酸和OPA衍生试剂反应后的产物吧?
用OPA反应没有衍生试剂的峰,这个峰应该就是反应产物的色谱峰,如果不确定,可以做个标曲,看这个峰的响应是否能成线性。把浓度降低试试柱效能不能好一点


因为是2.5ul标液加2.5ul衍生试剂,然后进样量是5ul,进样量只有几十ng,差不多是GB里最低的浓度了。而且怎么都不明白,试验条件完全是GB的,进的是标液,标准上的那个峰是怎么做出来的?
谱图显示的关系吧,标准里的响应值高,出峰时间晚,将谱图纵坐标往小了拉可能就能显得峰窄了


那你是觉得我的那张谱图峰出的还可以?
您可以看一下色谱峰的拖尾因子和柱效,如果符合要求,就可以了。《药典》好像规定拖尾因子T为0.95~1.05


请问这两个参数是怎么查的?
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衍生试剂不出峰?你图里没有啊


就这一个峰,如果把标液换成是水,这个峰就没有了,那这个峰应该就是牛磺酸和OPA衍生试剂反应后的产物吧?
用OPA反应没有衍生试剂的峰,这个峰应该就是反应产物的色谱峰,如果不确定,可以做个标曲,看这个峰的响应是否能成线性。把浓度降低试试柱效能不能好一点


因为是2.5ul标液加2.5ul衍生试剂,然后进样量是5ul,进样量只有几十ng,差不多是GB里最低的浓度了。而且怎么都不明白,试验条件完全是GB的,进的是标液,标准上的那个峰是怎么做出来的?
谱图显示的关系吧,标准里的响应值高,出峰时间晚,将谱图纵坐标往小了拉可能就能显得峰窄了


那你是觉得我的那张谱图峰出的还可以?
您可以看一下色谱峰的拖尾因子和柱效,如果符合要求,就可以了。《药典》好像规定拖尾因子T为0.95~1.05


请问这两个参数是怎么查的?
如果工作站安装了系统适应性,可以用软件计算
kanhama
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我做的也是这样,有点前沿,可能我要求低,出来了,能用,ok,行了。
初学生学习
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