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主题：【求助】峰前沿，怎么都消除不了，求大神们帮忙。

浏览0 回复16 电梯直达
moshanghuakai
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发表于：2016/06/02 09:52:24 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
hilic色谱柱，分析，GMP, ATP和GDP。ATP和GDP不容易分开，所以梯度设计变化较小。具体为：A相 10mM KH2PO4, 0.02% 三乙胺，pH 约为6.8. B相 85%ACN/15%A相。 梯度为：
0min, 100%B;
3mim, 10%A+90B%;
10min, 10%A+90B%;
13min, 15%+85%B；
15min,15%+85%B;
17min, 50%A+50%B;
19min; 50%A+50%B.
19.1mim; 100%B.
结果如图，分倒是分开了，但峰前沿很明显，开始以为是溶解样品的溶剂问题，用流动相溶解还是有前沿，柱效也测了，没问题。所以想问问大神们这是怎么回事儿，我该怎么做。
是样品在流动相中溶解的不好造成的吗？还是怎么回事啊
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2016/6/2 16:48:31 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
怎么没人理我啊，高人都在哪里啊
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2016/6/2 17:29:24 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
方法是标准方法吗？样品的纯度高吗，有没有干扰成分没有分开的可能
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2016/6/2 18:44:54 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
方法是自己摸索的方法，没有标准方法啊。样品纯度是95-98这样子吧，不至于有这么多的杂质啊，感觉还是方法的问题啊


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武灵
zhonghuashendun
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2016/6/2 19:24:57 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 moshanghuakai(moshanghuakai) 发表:
方法是自己摸索的方法，没有标准方法啊。样品纯度是95-98这样子吧，不至于有这么多的杂质啊，感觉还是方法的问题啊
样品纯度都是95-98？标准品呢？
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武灵
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2016/6/2 19:29:18 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
弱弱的请教下，ATP是不是腺嘌呤核苷三磷酸？
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moshanghuakai
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2016/6/2 21:44:45 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 武灵(zhonghuashendun) 发表:
弱弱的请教下，ATP是不是腺嘌呤核苷三磷酸？
是的，就是这个腺嘌呤核苷三磷酸
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moshanghuakai
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2016/6/2 21:45:46 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 武灵(zhonghuashendun) 发表:
样品纯度都是95-98？标准品呢？


就用纯度95-98的做标准品了
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moshanghuakai
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2016/6/2 21:48:08 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
另外，用初始流动相溶解样品，假设我的初始流动相是90%乙腈/10% 10mM KH2PO4，0.02%三乙胺, 样品溶解溶剂是90%已经/10%水，这算是起始流动相溶解样品吗
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moshanghuakai
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2016/6/2 21:49:16 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感觉，现在仪器信息网，冷清多了，没多少人上的样子啊，都是版主在回复啊
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有水有渝
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2016/6/3 9:09:27 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
把流动相pH调节至酸性试试，如2-3之间，
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