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主题：【求助】4-硝基苯酚的电泳峰为倒峰是怎么回事？

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小冬1106
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发表于：2014/09/13 19:21:54 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位好，今天使用硼砂缓冲液pH9.0来检测4-硝基苯酚的标品，但是230nm的出现了一个类似正弦的峰，280nm的出现一个很大的倒峰，两者的出峰时间一样，这是怎么回事？
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2014/9/14 21:37:11 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这说明在那个出峰时间有物质经过，在230 nm处吸收高，在280 nm处吸收低
该帖子作者被版主 nini2006加 3积分， 2经验，加分理由：参与
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小冬1106
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2014/9/15 13:51:47 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:

这说明在那个出峰时间有物质经过，在230 nm处吸收高，在280 nm处吸收低


那这个物质就是我的检测物吧，230nm处高就高吧，为什么会是基线上下的峰？我的吸收波长是不是选的不合适？谢谢了
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nini2006
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2014/9/15 22:11:14 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由wy20071722发表： 这说明在那个出峰时间有物质经过，在230 nm处吸收高，在280 nm处吸收低
说明有东西没分开吧，切该物质在280nm处无吸收，所以是倒峰。
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ericwong
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2014/9/16 8:41:24 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小冬1106(v2785634) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:

这说明在那个出峰时间有物质经过，在230 nm处吸收高，在280 nm处吸收低


那这个物质就是我的检测物吧，230nm处高就高吧，为什么会是基线上下的峰？我的吸收波长是不是选的不合适？谢谢了

"为什么会是基线上下的峰？"，这句话没弄明白，所谓的峰不就是在基线上下的么？
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nini2006
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2014/9/16 14:01:30 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ericwong(ericwong) 发表:
原文由 小冬1106(v2785634) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:

这说明在那个出峰时间有物质经过，在230 nm处吸收高，在280 nm处吸收低


那这个物质就是我的检测物吧，230nm处高就高吧，为什么会是基线上下的峰？我的吸收波长是不是选的不合适？谢谢了

"为什么会是基线上下的峰？"，这句话没弄明白，所谓的峰不就是在基线上下的么？
就是倒峰。
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小冬1106
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2014/9/16 21:49:12 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ericwong(ericwong) 发表:
原文由 小冬1106(v2785634) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:

这说明在那个出峰时间有物质经过，在230 nm处吸收高，在280 nm处吸收低


那这个物质就是我的检测物吧，230nm处高就高吧，为什么会是基线上下的峰？我的吸收波长是不是选的不合适？谢谢了


"为什么会是基线上下的峰？"，这句话没弄明白，所谓的峰不就是在基线上下的么？


就是那个正弦形状的峰
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小冬1106
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2014/9/18 11:00:39 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

原文由wy20071722发表： 这说明在那个出峰时间有物质经过，在230 nm处吸收高，在280 nm处吸收低
说明有东西没分开吧，切该物质在280nm处无吸收，所以是倒峰。


280nm倒峰我理解了，但是我用的是纯的4-硝基苯酚（纯度98%），这个存在没分开的情况吗？谢谢了
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nini2006
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2014/9/18 11:31:36 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小冬1106(v2785634) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

原文由wy20071722发表： 这说明在那个出峰时间有物质经过，在230 nm处吸收高，在280 nm处吸收低
说明有东西没分开吧，切该物质在280nm处无吸收，所以是倒峰。


280nm倒峰我理解了，但是我用的是纯的4-硝基苯酚（纯度98%），这个存在没分开的情况吗？谢谢了
有没可能是溶剂？你用的什么来溶解样品的？
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ericwong
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2014/9/22 9:18:43 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主把图贴出来，大家或许能更明白一些
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小冬1106
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2014/9/22 9:47:56 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 小冬1106(v2785634) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

原文由wy20071722发表： 这说明在那个出峰时间有物质经过，在230 nm处吸收高，在280 nm处吸收低
说明有东西没分开吧，切该物质在280nm处无吸收，所以是倒峰。


280nm倒峰我理解了，但是我用的是纯的4-硝基苯酚（纯度98%），这个存在没分开的情况吗？谢谢了
有没可能是溶剂？你用的什么来溶解样品的？


用的磷酸缓冲液，这是不是浓度太大引起电渗流不稳？
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