原文由 fiyingwing(fiyingwing) 发表:
而对于目前的状况,在确定流动相和样品完全过滤以后,可以考虑换根新的色谱柱。并且时刻观察压力上升状况,防止同样状况发生。
如果没有新柱子,把色谱柱反接用这种“最终绝招”我是“绝对”不会教你的。
样品前处理是否有蛋白或者脂类的物质没沉淀掉也有影响。蛋白一般过0.22滤膜就过滤掉了(或者过滤不下去)。
脂溶性杂质就比较麻烦,只有高比例甲醇或者乙腈才能冲掉。苯甲酸,卡马西平,都是强极性偏水溶性的药物,这些的流动相条件一般是冲不掉脂溶性杂质的,所以加入梯度洗脱,或者是每隔几个样品就加一针高比例的甲醇/乙腈冲洗10分钟会好很多。
PS.W家UPLC的性能走梯度就很明显发挥出来了。添加剂多组分的梯度能在4-6分钟内走完。普通的HPLC系统一般要走10分钟以上。非广告,只是看最近坛子里“XX是骗局”的帖子有感。