主题:求助 柱子冲洗

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nixiaolong
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应该是柱子堵了,低流速冲洗吧,实在不行就把柱筛板超声
enslyde
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原文由 fiyingwing(fiyingwing) 发表:
而对于目前的状况,在确定流动相和样品完全过滤以后,可以考虑换根新的色谱柱。并且时刻观察压力上升状况,防止同样状况发生。

如果没有新柱子,把色谱柱反接用这种“最终绝招”我是“绝对”不会教你的。

样品前处理是否有蛋白或者脂类的物质没沉淀掉也有影响。蛋白一般过0.22滤膜就过滤掉了(或者过滤不下去)。

脂溶性杂质就比较麻烦,只有高比例甲醇或者乙腈才能冲掉。苯甲酸,卡马西平,都是强极性偏水溶性的药物,这些的流动相条件一般是冲不掉脂溶性杂质的,所以加入梯度洗脱,或者是每隔几个样品就加一针高比例的甲醇/乙腈冲洗10分钟会好很多。

PS.W家UPLC的性能走梯度就很明显发挥出来了。添加剂多组分的梯度能在4-6分钟内走完。普通的HPLC系统一般要走10分钟以上。非广告,只是看最近坛子里“XX是骗局”的帖子有感。


多谢指点啊
dxylive
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我们用的也是这台仪器Hclass,也出现和楼主一样的情况,不过我们是柱子前面那个铜和钢做的接头里面的筛板堵了,换一个就好了,你可以试试:下掉柱子,升上你工作的流速,看看压力是不是正常的,不是的话就是筛板堵了。

这台仪器就是接柱的这个和柱相连的接头设计的不好那线一不小心就会和接头断开,买一个2000来块。
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