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液相色谱（LC）
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主题：关于奶粉检测黄曲霉毒素M1时的过滤问题！！！！

浏览0 回复8 电梯直达
神在洛城
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发表于：2014/10/24 19:03:04 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：10积分 状态： 已解决
我做的是高效液相色谱，大致的步骤是，称10g全脂乳粉，用50℃温水溶解定容至100mL容量瓶中，倒入50mL离心管中离心11000r/min  10min，再用漏斗过滤至50mL量筒中收集滤液，待免疫亲和柱过滤。用快速滤纸过滤就很慢很慢了，有时好不容易收集了滤液上免疫亲和柱也容易堵，想问一下大家怎么能提高过滤速度，是要多离心几次吗？还是要加乙酸铅沉淀蛋白呢？要是加的话要加多少浓度多少毫升呢？加乙酸铅会不会对黄曲霉毒素M1有影响呢？
推荐答案：夏天的雪回复于2014/10/25
可以参看免疫亲和柱里的使用说明书，说明书里针对不同样品会有相应的样品前处理过程，可以参看。国标GB/T 23212-2008中是用冷冻离心后过滤的。蛋白质沉淀剂没有尝试过，可以进行加标看回收率。
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夏天的雪
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2014/10/25 9:14:21 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以参看免疫亲和柱里的使用说明书，说明书里针对不同样品会有相应的样品前处理过程，可以参看。国标GB/T 23212-2008中是用冷冻离心后过滤的。蛋白质沉淀剂没有尝试过，可以进行加标看回收率。
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神在洛城
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2014/10/25 18:23:37 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
可以参看免疫亲和柱里的使用说明书，说明书里针对不同样品会有相应的样品前处理过程，可以参看。国标GB/T 23212-2008中是用冷冻离心后过滤的。蛋白质沉淀剂没有尝试过，可以进行加标看回收率。

谢谢您。我会去参考一下的！
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wangku
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2014/10/26 11:00:08 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你这样处理应该不会过的太慢，奶粉是慢点，过免疫柱我们一般也得30到60分钟，中间过得慢，可以用根细的吸管伸到免疫柱里捏几下，让空气把沉淀震起来，会快一点。
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神在洛城
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2014/10/26 18:38:19 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wangku(wangku) 发表:
你这样处理应该不会过的太慢，奶粉是慢点，过免疫柱我们一般也得30到60分钟，中间过得慢，可以用根细的吸管伸到免疫柱里捏几下，让空气把沉淀震起来，会快一点。


谢谢您。我明天就试试希望能成功。嘻嘻。
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wslmpol
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2014/10/27 10:11:40 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
蛋白质沉淀用氰化钾和硫酸锌比较好吧。
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神在洛城
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2014/10/27 18:34:48 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wslmpol(wslmpol) 发表:
蛋白质沉淀用氰化钾和硫酸锌比较好吧。


谢谢你
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苏微
v2956376
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2014/11/7 13:48:58 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的什么规格的亲和柱？过样慢的话可以用针筒打的，或者用气流架。3ml的话可能要用个转接头
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神在洛城
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2014/11/10 20:28:33 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 苏微(v2956376) 发表:
用的什么规格的亲和柱？过样慢的话可以用针筒打的，或者用气流架。3ml的话可能要用个转接头


恩恩。谢谢啦。已经算是解决了。就是缺了超声样品的步骤。
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手机版： 关于奶粉检测黄曲霉毒素M1时的过滤问题！！！！
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