和尚头也能高效液相色谱法检测

和尚头，一种中药名称，又名续断，是川续断科多年生草本植物川续断的根。该药物具有“续折接骨”功效，因而得名续断。

续断具有很多药物疗效，其中安胎、补肝肾、定经络、生新血、破瘀血、强筋健体、止痛续骨药效明显。可治咳嗽咳血、胎漏、遗精、跌打损伤、金疮、痔漏、痈疡、多种妇科疾病等。

这个药品有点意思吧，下面介绍下这种药品高效液相色谱法检测，更有意思，要往下看哦。

实验原理

取适量粉末样品甲醇溶解，超声提取等处理后，由进样器进入高效液相色谱系统，经C18色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量（外标法）计算。

仪器及试剂

仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+等度泵+柱温箱+进样器+C18色谱柱），超声波清洗仪，溶剂过滤器，电子天平，粉碎装置等。

试剂：甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）、超纯水等。

样品制备

对照品溶液制备：精密称取川续断皂苷Ⅵ对照品50mg于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，配制成2mg/m1川续断皂苷Ⅵ对照品储备液。精密量取储备液0.75ml，置于10ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，配制成0.15mg/m1川续断皂苷Ⅵ对照品溶液，备用。

供试品溶液制备：精密称取和尚头细粉样品0.5g，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟后，放冷，再次称定重量，用甲醇补足减少的重量，摇匀，0.45um微膜滤过，精密量取滤液5ml，置于50ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，待测。

色谱条件

检测器：紫外检测器
色谱柱：PromosilC18，4.6 X 250mm，5μm色谱柱
S/N:P9510525CIL0835

流动相：乙腈：水=30:70（V:V）

检测波长：212 nm

流速：1.0 mL/min

柱温：30℃

进样量：20μl

对照品色谱图：

供试品色谱图：

以上是药典方法检测结果，效果还行，只是检测时间略长，下面我们就调整下色谱条件，具体如下。

先改变下色谱柱温度，改为40℃，其它条件不变，结果如下：

对照品色谱图：

供试品色谱图：

再改变下流动相，乙腈：水=40:60（V:V），其它条件不变，结果如下：

对照品色谱图：

供试品色谱图：

最后换一根色谱柱，pGrandsil-STC-C18色谱柱，4.6 X 150mm，5μm，其它条件不变，结果如下：

对照品色谱图：

供试品色谱图：

从以上色谱图可以看出，以上四种方法，检测和尚头样品中川续断皂苷Ⅵ含量效果都不错，都较准确、快速，都可以作为该样品的检测方法。但优化色谱条件后的效果更好些，尤其是更换更理想的色谱柱这种方法，效果最为明显。其优点在于色谱峰形更好；峰更窄、更高，检出限更低；检测时间更短；成本更低（短的色谱柱更便宜，流动相费用也相对低）；系统压力低，系统适应性更好等，这种方法更适合该样品检测。

总之优化色谱峰形，提高方法灵敏度，缩短检测时间方法很多种，以上我们通过升高色谱柱温度，增加流动相中有机相含量，更换更理想的色谱柱已验证了方法的可行性，另外增加高压泵流速，也会起到以上效果，但这样对色谱柱损坏较大，一般情况下不采用。有时检测高含量样品时我们还可以降低样品含量，减少进样量，也可以达到优化色谱峰形、提高方法灵敏度等效果。当然提高检测效果方法还很多，不同样品，我们采用的方法也会不尽相同，面对具体样品，具体情况我们尽量选择一种最佳方式，以达到我们所期望的效果。

本方法（及优化方法)只适合该样品检测，只供参考，切不可盲目效仿。